血管緊張素Ⅱ?qū)θ四氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生超氧陰離子、PAI的影響.pdf

1、目的：探討血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生超氧陰離子(O2)和纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的作用及機(jī)制，并探討O-2與PAI-1之間的相關(guān)性。 方法：取生長狀態(tài)良好的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304)，以1～3×10 5個(gè)/mL接種于96孔板中，按照實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行分組。實(shí)驗(yàn)分為A、B和C三部分進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)A：觀察不同濃度的AngII對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)產(chǎn)生O-2和PAI-1的影響，實(shí)驗(yàn)B：觀察不

2、同濃度的纈沙坦(Valsartan)對(duì)AngII刺激HUVECs對(duì)O-2和PAI-1的影響。實(shí)驗(yàn)C：觀察二甲苯基碘(DPI)、Valsartan、超氧化物歧化酶(SOD)對(duì)Ang II刺激HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1的影響。采用氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原法測定上清液O-2濃度，用酶聯(lián)免疫吸附法測定上清液中PAI-1的濃度。 結(jié)果：1．AngⅡ?qū)UVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1的影響。AngII在10-8～10-5mo

3、/L范圍內(nèi)呈濃度依賴性使HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1增加，在AngⅡ濃度10-6mol/L時(shí)O-2濃度為(186.03±9.32)U/L、PAI-1濃度為(141.00±4.82)ng/mL，與對(duì)照組[分別為(62.33±5.85)U/L和(60.67±3.51)ng/mL]相比有顯著性差異(P<0.01)，與Ang Ⅱ濃度為10-5mol/L組[分別為(199.50±9.99)U/L，(150.77±3.22)ng/mL]相比無

4、明顯差異(P=0.13，0.05)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)在相同濃度下AngII在6小時(shí)(h)即使HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1增加，24h達(dá)高峰[分別為(190.13±7.36)U/L，(136.17±3.82)ng/mL]與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.01)，與48h[分別為(187.33±9.87)U/L， (138.13±4.54)ng/mL]相比兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.74，0.60)。 2．纈沙坦對(duì)Ang Ⅱ促HUVEC

5、s產(chǎn)生0-2和PAI-1的抑制作用。與單用Ang Ⅱ(10-6mol/L)組[O-2濃度(163.56±5.50)U/L，PAI-1濃度(151.56±7.88)ng/mL]比較，在10-8～10-5mol/L范圍內(nèi)纈沙坦呈濃度依賴性降低Ang Ⅱ促HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1的作用，纈沙坦?jié)舛葹?0-6mol/L時(shí)達(dá)最大效應(yīng)[O-2濃度(76.20±2.52)U/L，PAI-1濃度(78.51±4.32)ng/mL]。單用10-

6、6mol/L的纈沙坦對(duì)HUVECs釋放O-2及PAI-1并無明顯影響。 3．DPI和SOD對(duì)Ang Ⅱ刺激HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1的影響。在用Ang Ⅱ刺激HUVECs之前加入DPI或者SOD，發(fā)現(xiàn)與Ang Ⅱ(10-6mol/L)組[O-2濃度(163.56±6．82)U/L]相比，DPI和SOD可顯著降低AngⅡ刺激HUVECs產(chǎn)生O-2的作用[O-2濃度分別為(71.944±2.17)U/L，(53.88±4.0

7、3)U/L(P<0.01)]；同時(shí)也明顯抑了AngⅡ刺激PAI-1的產(chǎn)生[分別為(81.12±4.83)ng/mL和(74.86±5.27)ng/mL]，與AngⅡ組[(150.70±3.38)ng/mL]相比有顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論：1．AngⅡ能明顯、快速的刺激HUVECs產(chǎn)生O-2和PAI-1，且呈濃度和時(shí)間依賴性。 2．Ang Ⅱ通過作用于AT1受體激活NADPH氧化酶的途徑使HUVECs產(chǎn)生O-2和