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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)為實(shí)驗(yàn)材料,以健康老年人及老年高血壓患者血清作為損傷因素,建立反映健康老年人及老年高血壓患者特點(diǎn)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型,采用MTT比色法檢測(cè)不同處理組血清對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的的影響,通過(guò)測(cè)定各組內(nèi)皮細(xì)胞中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、活性氧(ROS)的變化,探討老年人血清對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。
方法:
取南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科新生兒臍帶提取人臍靜
2、脈內(nèi)皮細(xì)胞并鑒定,培養(yǎng)3-5代待用,收集健康青年人、正常老年人、老年高血壓患者血清各20份,實(shí)驗(yàn)按空白對(duì)照組、正常青年組、正常老年組、老年高血壓組分組,空白組只加培養(yǎng)基,不加血清,各組分別與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞孵育,在不同時(shí)間段收集細(xì)胞上清液及細(xì)胞,采用MTT方法檢測(cè)各組血清對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖情況的影響,采用氧化還原方法檢測(cè)各組細(xì)胞上清液NO含量,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ET-1含量,流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)ROS釋放量,采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理數(shù)據(jù)結(jié)果
3、,比較各組結(jié)果有無(wú)差別。
結(jié)果:
1.各組細(xì)胞在不同時(shí)間段細(xì)胞增殖活力也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。在同一時(shí)間點(diǎn),健康青年組、健康老年組及老年高血壓組細(xì)胞增殖活力在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異(P>0.05),空白對(duì)照組與其他三組細(xì)胞增殖活力在統(tǒng)計(jì)學(xué)上均有顯著差異(P<0.05);
2.各處理組血清與內(nèi)皮細(xì)胞孵育12h、24h后,在同一時(shí)間點(diǎn),健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO均呈梯度降低,差異具
4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),各組內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)24h NO釋放量比12h NO釋放量增加,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);
3.各實(shí)驗(yàn)組血清與內(nèi)皮細(xì)胞孵育12h、24h后,在同一時(shí)間點(diǎn),健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細(xì)胞釋放ET-1均呈梯度增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),各組內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)24h ET-1釋放量比12h ET-1釋放量增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);
4.各實(shí)驗(yàn)組血清與
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