血管緊張素-（1-7）對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞E-選擇素和單核細(xì)胞趨化蛋白-1的影響.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)Ang-(1-7)對(duì)血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導(dǎo)人臍靜脈細(xì)胞(HUVECs)分泌E-sel和MCP-1的觀察，闡明Ang-(1-7)拮抗AngII所致的動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)，并初步探討Ang-(1-7)的作用機(jī)制。 方法：1、經(jīng)形態(tài)學(xué)及抗Ⅷ因子抗體免疫熒光染色鑒定的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，按以下分組加入不同干擾因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；2、實(shí)驗(yàn)分組①對(duì)照組：不加干預(yù)因素；②AngⅡ組：加入AngⅡ 100nmol/L；③Ang-(1

2、-7)組：加入Ang-(1-7)1000nmol/L；④Ang Ⅱ+Ang-(1-7)組：分別用Ang-(1-7)10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000nmol/L預(yù)處理30min后，再加入Ang Ⅱ 100nmol/L；⑤AngⅡ+Ang-(1-7)+A-779組：先用1000nmol/LA-779預(yù)處理30min后，再用終濃度為1000nmol/L Ang-(1-7)預(yù)處理30min，最后加入終濃度1

3、00nmol/L Ang Ⅱ；3、各組用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和半定量RT-PCR法從蛋白和mRNA水平檢測(cè)E-sel和MCP-1的表達(dá)情況。 結(jié)果：1、正常細(xì)胞生長(zhǎng)良好，呈鵝卵石樣鑲嵌排列，細(xì)胞透明度大，輪廓不清。熒光免疫組化染色法，可檢測(cè)到培養(yǎng)的HUVEC的Ⅷ因子相關(guān)抗原為陽(yáng)性；2、與對(duì)照組比，AngⅡ(100nmol/L)使E-sel和MCP-1的蛋白分泌量明顯增加，E-sel和MCP-1 mRNA的表達(dá)顯著升高(P

4、<0.01)；Ang-(1-7)(1000nmol/L)使E-sel和MCP-1的蛋白分泌量降低，E-sel和MCP-1 mRNA表達(dá)亦降低(P<0.01)；3、混合刺激組中，與AngⅡ組比較，Ang-(1-7) (10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000 nmol/L)呈劑量依賴性的抑制Ang Ⅱ刺激E-sel、MCP-1的蛋白分泌和E-sel、MCP-1 mRNA的表達(dá)(P<0.01)；4、加入A-77