基因VIId亞型新城疫病毒嚴(yán)重侵害免疫系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)和宿主機(jī)制.pdf

1、ThemolecularbasisandthehostmechanismoftheseverepathologyintheimmunesystemcausedbygenotypeVlldNewcastlediseasevirusPhDcandidate：ZengleiHuAdvisor：ProfXiufanLiuADissertationSubmittedtoYangzhouUniversityInPartialFulfillmento

2、ftheRequirementfortheDoctorDegreeinAgricultureCompletedinMay，2013CommencementinJune，2013Il揚州大學(xué)博：卜學(xué)位論文損傷有關(guān)。2基因VIId亞型NDV在免疫器官中的致病特性本研究用兩株基因VIId亞型NDV(JS3／05和JS5／05)、基因IX型NDVF48E8和基因Iv型NDVHerts／33感染SPF雞，比較了病毒在淋巴組織中的病理變化、病毒復(fù)制

3、和細(xì)胞因子應(yīng)答。為了評價宿主應(yīng)答在NDV的致病性中的作用，我們選擇JS5／05和Herts／33感染雞的脾臟進(jìn)行差異轉(zhuǎn)錄組學(xué)試驗。我們發(fā)現(xiàn)四個毒株對雞都為致死性，但是JS3／05和JS5／05在脾臟和胸腺中造成的病理學(xué)損傷更為嚴(yán)重，表現(xiàn)為組織的廣泛性壞死、淋巴細(xì)胞大量減少和大量巨噬細(xì)胞浸潤等；而Herts／33僅引起脾臟萎縮和中度淋巴細(xì)胞增生或減少。病毒載量測定顯示，JS3／05和JS5／05在淋巴組織中的復(fù)制水平顯著高于F48E8和H

4、efts／33。基因芯片結(jié)果顯示，JS5／05和Herts／33誘導(dǎo)的宿主應(yīng)答在性質(zhì)上是相似的，在量上是不同的，表現(xiàn)在JS5／05可以上調(diào)大量的炎性反應(yīng)相關(guān)基因的表達(dá)，且基因的表達(dá)水平顯著高于Herts／33調(diào)控的基因，說明JS5／05誘發(fā)了更為強(qiáng)烈的機(jī)體炎癥反應(yīng)。細(xì)胞因子測定結(jié)果顯示，JS3／05和JS5／05誘導(dǎo)的IFNp、IL1B和IL18的表達(dá)水平高于F48E8和Hefts／33誘導(dǎo)的水平，說明JS3／05和JS5／05在淋巴組

5、織中可以誘導(dǎo)更強(qiáng)的細(xì)胞因子應(yīng)答。我們的結(jié)果說明，基因VIId亞型NDV的高效復(fù)制及其誘導(dǎo)的過激的炎性反應(yīng)共同造成了免疫器官中嚴(yán)重的病理損傷。3基因VIId亞型NDV嚴(yán)重?fù)p害免疫系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)本研究利用反向遺傳學(xué)手段，在基因VIld亞型NDVJS5／05和基因IV型NDVHerts／33之間進(jìn)行基因互換，構(gòu)建了一系列的重組病毒?；蚧Q方式包括M、F和HN基因的單獨互換、F和HN雙基因互換以及M、F和HN三基因的同時互換。我們評價了重組病

6、毒在淋巴組織中的臨床病理學(xué)特性、病毒復(fù)制和誘導(dǎo)的細(xì)胞因子應(yīng)答。結(jié)果顯示，單獨互換M、F或HN基因以及互換F和fIN雙基因都不能使JS5／05和Herts／33在脾臟中的病變發(fā)生轉(zhuǎn)換。但是，JS5／05骨架中同時表達(dá)Herts／33的M、F和HN基因時，重組病毒造成脾臟壞死的能力消失，病變?yōu)槠⑴K萎縮、無壞死灶，與rHerts／33的病變一致；相應(yīng)地，Herts／33骨架中同時表達(dá)JS5／05的M、F和HN基因時，重組病毒獲得了誘導(dǎo)脾臟嚴(yán)重