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文檔簡(jiǎn)介
1、食蟹猴-豬異種體細(xì)胞核移植(iSCNT)研究的主要目的是從iSCNT胚胎中獲得具有與人類相似遺傳背景的胚胎干細(xì)胞(ESCs),作為醫(yī)學(xué)研究和科學(xué)研究的試驗(yàn)材料。iSCNT研究不僅可以支持人類治療性克隆、靈長(zhǎng)類早期胚胎發(fā)育和核移植過程中的核質(zhì)互作、核重編程和表觀遺傳學(xué)等基礎(chǔ)研究。同時(shí),還可以為保護(hù)瀕危動(dòng)物,甚至是拯救已滅絕動(dòng)物而進(jìn)行的iSCNT提供參考。本研究主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
1:優(yōu)化食蟹猴-豬異種體細(xì)胞核移植(iSCN
2、T)胚胎融合/激活參數(shù),篩選出最佳的融合/激活條件;探討以目前常用的豬胚胎培養(yǎng)基(NCSU-23和PZM-3)和靈長(zhǎng)類培養(yǎng)基(HECM-10)培養(yǎng)iSCNT胚胎,以期篩選出適合iSCNT胚胎體外發(fā)育的胚胎培養(yǎng)基。結(jié)果表明,挑選直徑20μm的食蟹猴耳部成纖維細(xì)胞(MEF)作為供體細(xì)胞時(shí),采用2次電場(chǎng)強(qiáng)度為60V/mm或80V/mm,作用時(shí)間為30μs的直流脈沖可以獲得最佳的融合/激活效果,并且獲得的iSCNT胚胎可以發(fā)育到囊胚期。后續(xù)試驗(yàn)
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