過(guò)敏性紫癜患者B淋巴細(xì)胞Cosmc、T-合酶mRNA的表達(dá)與血清低半乳糖基化IgA1的變化.pdf

1、過(guò)敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura，HSP)是一種常見(jiàn)的系統(tǒng)性小血管炎。學(xué)齡期兒童發(fā)病率最高，男孩多于女孩，成年人發(fā)病率相對(duì)較低。臨床表現(xiàn)包括皮膚紫癜、腹痛或消化道出血、關(guān)節(jié)腫痛、紫癜性腎炎，少數(shù)患者可累及生殖、神經(jīng)等系統(tǒng)。HSP患者腎功能損害的發(fā)生率可高達(dá)50％[1]，嚴(yán)重影響本病的預(yù)后。盡管已往對(duì)HSP的研究取得了一些進(jìn)展，但至今為止，其發(fā)病機(jī)制尚未明了。目前認(rèn)為感染、體液免疫和細(xì)胞免疫紊亂、遺傳、食物和藥

2、物過(guò)敏、凝血與纖溶機(jī)制異常等因素與HSP的發(fā)病有關(guān)。其中體液免疫異常是HSP發(fā)病的重要環(huán)節(jié)，表現(xiàn)為B淋巴細(xì)胞多克隆活化，以IgA1為主的免疫球蛋白增多。HSP患者皮膚、腎小球及消化道黏膜中存在IgA1沉積[2-4]。其沉積的原因并不單純是因?yàn)镮gA1分泌量增多，而很大程度上取決于IgA1分子鉸鏈區(qū)O-糖基化程度降低。IgA1分子鉸鏈區(qū)O-糖基化由T-合酶(T-synthase，core1β3-galactosyltrans ferase

3、，C1 GAL、1)催化完成，分子伴侶Cosmc(core1β3Gal-T specific molecularchaperone)對(duì)其正確折疊和催化活性至關(guān)重要[5]。因此，Cosmc和低半乳糖基化IgA1(galactose-deficient IgA1，Gd-IgA1)可能在HSP的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。
　　目的:
　　本研究通過(guò)檢測(cè)HSP患者外周血B淋巴細(xì)胞Cosmc、T-合酶mRNA表達(dá)量及血清Gd-IgA1

4、水平的變化，探討B(tài)淋巴細(xì)胞Cosmc mRNA表達(dá)量與血清Gd-IgA1水平變化的關(guān)系，及三者如何在HSP發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用。
　　方法:
　　1研究對(duì)象:
　　病例組:選取2014年1月至2014年8月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科門(mén)診及病房的56例HSP患者作為病例組。其中男性30人，女性26人，年齡6-42歲，平均年齡16.84±8.27歲，病程2-60天。未合并其他過(guò)敏性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤或其他嚴(yán)重系統(tǒng)性疾

5、病;4周內(nèi)未使用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑等藥物;血小板計(jì)數(shù)及凝血功能等檢查均正常。根據(jù)臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查，將56例HSP患者分為4組:(1)皮膚型紫癜組22例;(2)關(guān)節(jié)型紫癜組9例;(3)腹型紫癜組12例;(4)腎型紫癜組13例。
　　正常對(duì)照組:選取20例健康志愿者為正常對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，性別、年齡與病例組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2研究方法:
　　采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測(cè)HSP患者外周血B淋巴細(xì)胞Cosm

6、c、T-合酶mRNA表達(dá)量，凝集素親和ELISA法檢測(cè)血清Gd-IgA1水平的變化，并與對(duì)照組進(jìn)行比較。使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析Cosmc mRNA表達(dá)量與血清Gd-IgA1水平間的相關(guān)性。
　　3統(tǒng)計(jì)分析:
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。根據(jù)數(shù)據(jù)的正態(tài)性及方差齊性分析，符合正態(tài)性分布者用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，否則用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示。多組間比較采用One-way ANOVA單因素方差分析或非參數(shù)檢驗(yàn)的Kr

7、uskal-Wallis H檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)或Nemenyi檢驗(yàn)， Spearman秩相關(guān)用于相關(guān)性分析，當(dāng)P＜0.05時(shí)認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1 HSP各組與正常對(duì)照組Cosmc mRNA相對(duì)表達(dá)量(RQ值)分別為:皮膚型紫癜組0.849±0.239，關(guān)節(jié)型紫癜組0.767±0.181，腹型紫癜組0.719±0.183，腎型紫癜組0.459±0.121，正常對(duì)照組1.146±0.232。HSP

8、各組及正常對(duì)照組間CosmcmRNA相對(duì)表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=23.37，P=0.000);HSP各組Cosmc mRNA相對(duì)表達(dá)量均低于正常對(duì)照組(P＜0.01)，腎型紫癜組又低于皮膚型紫癜組、關(guān)節(jié)型紫癜組、腹型紫癜組(P＜0.01)，后三者間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2 HSP各組與正常對(duì)照組T-合酶mRNA相對(duì)表達(dá)量（RQ值）分別為:皮膚型紫癜組2.249±0.707，關(guān)節(jié)型紫癜組1.987±0.637，腹型

9、紫癜組2.182±0.589，腎型紫癜組1.837±0.883，正常對(duì)照組2.310±0.764。HSP各組與正常對(duì)照組間T-合酶mRNA相對(duì)表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=1.05，P=0.388)。
　　3 HSP各組與正常對(duì)照組血清Gd-IgA1水平分別為:皮膚型紫癜組1161.79(774.50) U/ml，關(guān)節(jié)型紫癜組1345.84(795.74) U/ml，腹型紫癜組1223.41(982.31) U/ml，腎型紫癜組1835

10、.02(1090.55) U/ml，正常對(duì)照組839.10(587.07) U/ml。HSP各組及正常對(duì)照組間血清Gd-IgA1水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=7.063，P=0.000);HSP各組Gd-IgA1水平均高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，腎型紫癜組又高于皮膚型紫癜組、關(guān)節(jié)型紫癜組、腹型紫癜組(P＜0.05)，后三者間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　4 Spearman相關(guān)性分析:HSP患者血清Gd-IgA1水平與Cos

11、mc mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)R=-0.496，P＜0.01。
　　結(jié)論:
　　1 HSP患者外周血B淋巴細(xì)胞Cosmc mRNA表達(dá)低下，血清Gd-IgA1水平升高，二者水平呈負(fù)相關(guān);而T-合酶mRNA表達(dá)正常。Cosmc mRNA表達(dá)低下可能是血清Gd-IgA1水平升高，最終導(dǎo)致HSP的關(guān)鍵原因。
　　2與其他三組HSP患者比較，腎型紫癜組Cosmc mRNA表達(dá)減低、血清Gd-IgA1升高程度更加明