微囊化嗅鞘細(xì)胞移植對P2X4受體介導(dǎo)神經(jīng)病理痛的作用研究.pdf

1、目的：探討微囊化嗅鞘細(xì)胞移植治療神經(jīng)病理性疼痛對P2X4受體在背根神經(jīng)節(jié)表達(dá)的影響及作用。
　　方法：⒈將一只SD大鼠處死，取其嗅球，用NASH差速貼壁法培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞，并做嗅鞘細(xì)胞形態(tài)及純度鑒定；⒉制作微囊化嗅鞘細(xì)胞(microencapsulated olfactory ensheathing cells. MC-OECs)；⒊將96只雌雄不拘健康的SD大鼠，隨機(jī)分為4組（每組24只）：即假手術(shù)組（sham組）、坐骨神經(jīng)損傷模型

2、組（CCI組）、嗅鞘細(xì)胞移植組（OECs組）及微囊化嗅鞘細(xì)胞移植組（MC-OECs組）：將OECs及微囊化OECs移植到損傷坐骨神經(jīng)周圍；4.術(shù)后7、14d用行為學(xué)方法測定大鼠機(jī)械縮足反射閾值，運(yùn)用RT-PCR、免疫組織化學(xué)染色及蛋白印跡技術(shù)檢測L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體的表達(dá)水平情況。
　　結(jié)果：術(shù)后7、14d，（1）采用行為學(xué)方法檢測大鼠機(jī)械縮足反射閾值：與sham組對比，CCI組大鼠機(jī)械縮足反射閾值明顯減低；與CCI組

3、對比，OECs組與MC-OECs組大鼠機(jī)械縮足反射閾值明顯增加；與OECs組對比，MC-OECs組大鼠機(jī)械縮足反射閾值稍增加。(2) L4-5處背根神經(jīng)節(jié) P2X4受體 RT-PCR mRNA表達(dá)水平：CCI組與sham組相比， mRNA表達(dá)量明顯增加；而與CCI組對比，嗅鞘細(xì)胞組及微囊化嗅鞘細(xì)胞組表達(dá)水平明顯減低。（3）免疫組織化學(xué)染色：與sham組對比，CCI組L4-5背根神經(jīng)節(jié)陽性細(xì)胞P2X4受體陽性細(xì)胞平均吸光度明顯增加，而與C

4、CI組對比，OECs組及MC-OECs組則明顯減低。(4)蛋白印跡：與sham組對比，CCI組P2X4受體蛋白表達(dá)明顯增加；而與CCI組對比，OECs組及MC-OECs組則明顯減低。與OECs組對比，MC-OECs組在L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體mRNA、陽性細(xì)胞平均吸光度及蛋白表達(dá)水平稍低于OECs組。
　　結(jié)論：嗅鞘細(xì)胞及微囊化嗅鞘細(xì)胞移植能減輕坐骨神經(jīng)損傷后引起的神經(jīng)病理性疼痛，可能是通過降低L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受