脊髓P2X受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞在電針治療神經(jīng)病理痛中的作用研究.pdf

1、背景：
　　電針可改善神經(jīng)病理痛，但潛在機制尚不明確。既往研究表明神經(jīng)損傷后脊髓過表達(dá)的γ-干擾素（interferon-γ，IFN-γ）可通過上調(diào)P2X4受體使小膠質(zhì)細(xì)胞從靜息狀態(tài)變?yōu)榛罨癄顟B(tài)，從而引起機械痛覺過敏。然而，有研究表明P2X4受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞活化與熱痛覺過敏無關(guān)，因此電針緩解神經(jīng)病理痛的熱痛覺過敏應(yīng)當(dāng)存在其他機制。本研究假設(shè)電針是通過減少脊髓 IFN-γ過表達(dá)以抑制脊髓P2X4受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞緩解神經(jīng)損傷引起的

2、機械痛覺過敏，同時通過抑制P2X7受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞并減少其介導(dǎo)的白介素（interleukin，IL）-1β和/或IL-18過表達(dá)緩解神經(jīng)損傷引起的機械痛覺過敏和熱痛覺過敏。
　　方法：
　　本研究選用雄性Sprague-Dawley（SD）成年大鼠，建立坐骨神經(jīng)慢性縮窄模型、鞘內(nèi)注射IFN-γ模型或鞘內(nèi)注射BzATP模型。通過von Frey和Hargreaves測試評估機械痛閾和熱痛閾，通過免疫熒光、real-time

3、 PCR、ELISA和western blot等技術(shù)檢測脊髓P2X4受體、P2X7受體、IFN-γ、IL-1β和IL-18的表達(dá)水平。此外，運用鞘內(nèi)注射A-438079以判斷脊髓過表達(dá)的IL-1β和IL-18是否依賴于P2X7受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞，并原代培養(yǎng)小膠質(zhì)細(xì)胞以觀察IFN-γ對于P2X4受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞的活化作用以及P2X7受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的IL-1β和IL-18的釋放。
　　結(jié)果：
　　電針改善坐骨神經(jīng)慢性縮

4、窄模型大鼠的機械痛覺過敏和熱痛覺過敏，抑制脊髓P2X4受體和P2X7受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞活化，下調(diào)脊髓過表達(dá)的IFN-γ、IL-1β和IL-18。電針改善BzATP注射模型的痛覺過敏，并下調(diào)過表達(dá)的P2X7受體、IL-1β和IL-18。IFN-γ可引起P2X4受體陽性小膠質(zhì)細(xì)胞活化，但電針對于IFN-γ鞘內(nèi)注射疼痛模型沒有保護(hù)作用。此外，A-438079鞘內(nèi)注射可改善坐骨神經(jīng)慢性縮窄模型和BzATP鞘內(nèi)注射模型大鼠的痛覺過敏和IL-1β過