星狀交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞P2X-,3-受體介導(dǎo)心肌痛傷害性信息作用的研究.pdf

1、目的: 本研究探討P2X3受體在星狀神經(jīng)節(jié)(SG)神經(jīng)元細(xì)胞介導(dǎo)心肌痛傷害性信息傳遞中的作用。 方法: (1)用免疫組化和Western blotting(蛋白印跡技術(shù))檢測(cè)心肌缺血組，A-317491干預(yù)組和對(duì)照組三組大鼠SG神經(jīng)元P2X3的免疫反應(yīng)性和P2X3蛋自的表達(dá)。 (2)用原位雜交和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)P2X3mRNA表達(dá)。 (3)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察P2X受體激動(dòng)劑激活

2、電流及P2X3受體特異性拮抗劑的影響。 結(jié)果: (1)免疫組化結(jié)果顯示心肌缺血組，A-317491干預(yù)組和對(duì)照組SG神經(jīng)元P2X3受體陽(yáng)性細(xì)胞灰度值分別為219.87±7.59，203.43±10.67(p＜0.05)和198.09±24.43(p＜0.01)。 (2)原位雜交結(jié)果顯示心肌缺血組，A-317491干預(yù)組和對(duì)照組單位面積內(nèi)的灰度值為177.21±21.99，151.91±13.91(p＜0.01)和

3、148.52±32.12(P＜0.01)。 (3)Western blotting目的條帶在X光膠片上測(cè)得的光密度掃描值經(jīng)β-actin條帶的掃描值標(biāo)化為1.48±0.27，1.35±0.33(P＜0.01)和1.32 ±0.48(P＜0.01)。 (4)RT-PCR獲得目的電泳條帶的斑點(diǎn)密度掃描值經(jīng)β-actin條帶的掃描值標(biāo)化，心肌缺血組，A-317491干預(yù)組和對(duì)照組SG分別為0.231±0.004，0.135±0

4、.004，0.120±0.004。 (5)全細(xì)胞膜片鉗結(jié)果顯示隨ATP濃度(1-1000μmol/L)的增加，大鼠SG神經(jīng)元ATP-激活電流(IATP)增加；心肌缺血組IATP較對(duì)照組增大，ATP濃度為100μmol/L時(shí)心肌缺血組IATP為對(duì)照組的2.4±0.3倍，α,β-meATP-激活電流心肌缺血組也較對(duì)照組增大；A-317491濃度在100-10000nmol/L范圍內(nèi)，對(duì)心肌缺血組和對(duì)照組大鼠SG神經(jīng)元ATP(100μ

5、mol/L)和α，β-meATP(10μmol/L)的激活電流均有抑制作用，但對(duì)心肌缺血組IATP的抑制作用更為明顯。 結(jié)論: 心肌缺血后P2X3受體在星狀神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的表達(dá)增加、SG神經(jīng)元P2X受體激動(dòng)劑激活電流增大；P2X3受體特異性拮抗劑A-317491可減少心肌缺血后P2X3受體在星狀神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的表達(dá)，并明顯抑制心肌缺血后星狀神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元P2X3受體激活后增強(qiáng)的電流。結(jié)果表明星狀神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元P2X3受體涉及心肌痛傷害性