胃癌組織中 MGMT 基因的高甲基化以及 DNMT1 的表達(dá).pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)檢測胃癌組織以及癌旁組織中6-氧-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（MGMT）基因的甲基化以及MGMT蛋白的表達(dá)情況，分析MGMT基因甲基化的狀態(tài)與胃癌發(fā)生以及發(fā)展的關(guān)系。探究胃癌組織以及癌旁組織中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNA methyltransferase1,DNMT1）蛋白表達(dá)情況，分析其與胃癌的關(guān)系及臨床意義。另外還對胃癌組織中MGMT甲基化與DNMT1蛋白表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行初步的探究。
　　方法：

2、　　1.收集青島市市立醫(yī)院普外科于2015年1月至2016年7月切除的60例胃癌患者的新鮮胃癌組織及其相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本，胃癌組織取自癌灶中央非壞死區(qū)域，癌旁組織取自距離癌組織5cm以上，且術(shù)前未行放療、化療、靶向治療等抗腫瘤治療。提取組織DNA，采用甲基化特異性PCR（MSP）技術(shù)檢測上述組織標(biāo)本中MGMT基因甲基化狀態(tài)。分析MGMT基因甲基化與胃癌的關(guān)系。
　　2.提取胃癌組織及相應(yīng)癌旁組織中的RNA，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-多聚合酶鏈反

3、應(yīng)（RT-PCR）檢測MGMT及DNMT1的mRNA的表達(dá)情況。
　　3.用免疫組化SP法（IHC）檢測胃癌組織以及相應(yīng)的癌旁組織中MGMT和DNMT1的蛋白表達(dá)情況，綜合分析MGMT及DNMT1表達(dá)與胃癌的關(guān)系，并對胃癌中MGMT基因甲基化及DNMT1蛋白表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行初步探討。
　　結(jié)果：
　　1.胃癌組織中MGMT基因甲基化率為45.00%（27/60），明顯高于癌旁組織（13.33%，8/60），差異有意義（χ

4、2=14.56，P＜0.001）。
　　2.胃癌組織中MGMT mRNA陽性表達(dá)率低于癌旁組織（41.67%vs93.33%，χ2=36.51，P＜0.001）；而胃癌組織中DNMT1 mRNA陽性率明顯高于癌旁組織（76.67%vs18.33%，χ2=40.94，P＜0.001）。
　　3.MGMT mRNA陰性表達(dá)的胃癌組織中其基因的甲基化率較陽性表達(dá)者升高（57.14%vs28.00%，χ2=11.96，P＜0.05）

5、。
　　4.胃癌組織以及癌旁組織中MGMT以及DNMT1蛋白表達(dá)情況與mRNA表達(dá)基本一致，MGMT蛋白在胃癌組織中的表達(dá)陽性率（40%，24/60）明顯低于癌旁組織（93.33%，56/60），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.4，P＜0.001）。而DNMT1在胃癌組織中的表達(dá)陽性率（76.67%，46/60）卻明顯高于癌旁組織（6.67%，4/60），差異有意義（χ2=60.48，P＜0.001）。
　　5.胃癌組織中MG

6、MT與DNMT1蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.795，P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.MGMT基因高甲基化與胃癌的發(fā)生以及發(fā)展有關(guān)。
　　2.MGMT的低表達(dá)以及DNMT1的高表達(dá)在胃癌的發(fā)生過程中起重要作用。
　　3.在胃癌中MGMT高甲基化改變可能是導(dǎo)致MGMT低表達(dá)的原因之一。
　　4.DNMT1可能調(diào)控MGMT基因的甲基化過程。
　　意義：
　　胃癌是一種死亡率很高的惡性腫瘤，大部分