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1、上海師范大學(xué)碩士學(xué)位論文日本血吸蟲體被蛋白SjTSP1LHD重組蛋白和SjGCP核酸疫苗免疫保護(hù)效果初評(píng)估姓名:張娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師:林矯矯2012042 、日本血吸蟲抱雌溝蛋白( S j G C P ) 核酸疫苗的研究將編碼日本血吸蟲大陸株抱雌溝蛋白基因完整O R F 片段克隆到真核表達(dá)載體p W Ⅸ1 中,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒p ⅥⅨ1 /s j G C P ,三次肌肉注射B A L B /c 小鼠后,攻擊感染血吸
2、蟲尾蚴,4 2 d 剖殺小鼠沖蟲,計(jì)算減蟲率及肝臟、糞便減卵率,評(píng)估其免疫保護(hù)效果。用流式細(xì)胞術(shù)( F C M ) 檢測(cè)三次免疫后小鼠淋巴細(xì)胞亞群C D 4 + 、C D 8 + 占總淋巴細(xì)胞的百分比及細(xì)胞因子I L .4 、I F N 吖表達(dá)水平,探討p ⅥⅨ1 /S j G C P 核酸疫苗的免疫機(jī)制。小鼠經(jīng)重組真核質(zhì)粒免疫后誘導(dǎo)了3 7 .9 3 %的減蟲率,及4 4 .0 6 %、6 5 .4 6 %的肝臟減卵率和糞便減卵率,與
3、p ⅥⅨ1 組相比差異顯著。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表明重組質(zhì)粒免疫組淋巴細(xì)胞亞群C D 4 + 、C D 8 + 百分比增加,細(xì)胞因子I F N - 丫及特異性I g G 水平提高,與p ⅥⅨl 組比較差異顯著。在抗日本血吸蟲保護(hù)性免疫中,抱雌溝蛋白基因D N A 疫苗能夠誘導(dǎo)小鼠細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答,產(chǎn)生T l l l 廠r h 2 型混合的免疫反應(yīng),且以T I l l 型免疫反應(yīng)占優(yōu)勢(shì)地位,具有一定的抗血吸蟲感染的免疫保護(hù)效果。關(guān)鍵詞:日
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