日本血吸蟲表膜結(jié)構(gòu)蛋白Annexin基因克隆、表達與免疫保護效果評估.pdf

1、日本血吸蟲病是我國一種危害嚴重的人畜共患寄生蟲疾病。由于中間宿主釘螺難以消滅，治療藥物“吡喹酮”不能解決重復(fù)感染的難題，并且有可能誘導(dǎo)產(chǎn)生抗藥性，因此有必要研制高效、安全的抗血吸蟲病疫苗和新治療藥物。血吸蟲能夠在終末宿主體內(nèi)生活十幾年甚至幾十年，一定具有逃避宿主免疫應(yīng)答的有效方式；血吸蟲的體表被膜是由復(fù)雜的多層結(jié)構(gòu)組成的合胞體層，它直接受到宿主免疫系統(tǒng)的攻擊，血吸蟲之所以具有很強的自身保護能力，與其表膜密切相關(guān)，因此深入研究血吸蟲表膜蛋

2、白及其抗原組成及變化是研究血吸蟲與宿主之間相互作用、揭示血吸蟲免疫逃避機制的關(guān)鍵。本研究克隆了日本血吸蟲表膜蛋白Annexin的編碼基因，并對這個基因進行了表達及生物學(xué)功能的初步研究。 作者利用已經(jīng)公布的曼氏血吸蟲表膜蛋白Annexin基因序列，在日本血吸蟲EST庫中搜索到一個相應(yīng)的EST片段(GeneBank登錄號AY812989)，根據(jù)該EST序列，設(shè)計特異性引物，利用PCR技術(shù)克隆獲得日本血吸蟲表膜蛋白Annexin編碼基

3、因Sjan。序列分析表明Sjan基因的ORF含1023bp，編碼341個氨基酸，理論分子量39.4KD。并成功構(gòu)建該基因的重組表達質(zhì)粒pET28a(+)-Sjan，在大腸桿菌BL21(DE3)系統(tǒng)中成功表達，分子量為42.9KD；應(yīng)用純化的重組蛋白rSjan免疫BALB/c小鼠，獲得了23.27％的減蟲率和35.04％的肝組織減卵率。 本文克隆了編碼日本血吸蟲表膜蛋白Annexin的基因，成功將Sjan在大腸桿菌中表達，并在小鼠