日本血吸蟲重組抗原疫苗SjGCP-GST和Sj28GST免疫保護(hù)力和免疫機(jī)制初步研究.pdf

1、日本血吸蟲病(Schistosomiasis iaponicium)是一種嚴(yán)重危害人、畜健康,影響社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展的人畜共患寄生蟲病。近年來我國血吸蟲病防治工作取得了舉世矚目的成就,但由于血吸蟲病流行的生態(tài)環(huán)境沒有得到根本改變,傳染源控制困難,血吸蟲病在江湖川漢地區(qū)流行仍較嚴(yán)重。作為滅螺、藥物防治和其他綜合防治措施的重要補(bǔ)充,血吸蟲病疫苗的研究就顯得十分必要。迄今研制的一些日本血吸蟲疫苗保護(hù)效果還不夠理想,免疫佐劑是探索提高疫苗保護(hù)效果的

2、有效途徑之一。
　　 本論文應(yīng)用已經(jīng)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證明可誘導(dǎo)較高免疫保護(hù)作用的重組蛋白SjGCP和Sj28GST與3種佐劑(弗式佐劑、ISA206佐劑、ISA70M佐劑)配伍免疫BALB／c小鼠,再攻擊感染日本血吸蟲(尾蚴40±2條),收集成蟲和檢測(cè)每克肝臟蟲卵數(shù),計(jì)算減蟲率和肝臟減卵率。結(jié)果在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,兩種重組抗原均誘導(dǎo)了部分的抗日本血吸蟲感染的免疫保護(hù)效果。
　　 本論文進(jìn)一步利用流式細(xì)胞儀技術(shù)(FCM)和免疫酶聯(lián)吸

3、附法(ELISA)檢測(cè)抗原免疫的小鼠機(jī)體細(xì)胞和體液免疫情況,對(duì)這兩種抗原結(jié)合三種佐劑誘導(dǎo)的免疫保護(hù)機(jī)制進(jìn)行初步的研究。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了第3次免疫1周后的小鼠的CD4+、CD8+細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子IL2、IL4、IL10、IFNγ及IL12。通過ELISA方法檢測(cè)免疫前、第3次免疫小鼠1周后以及尾蚴攻擊6周后血清中的抗體IgG及其亞型IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3,抗體IgE、IgA、IgM的水平。與空白組相比,免疫組C

4、D4+、CD8+的數(shù)值以及CD4+／CD8+比值,細(xì)胞因子IL2、IL4、IL10、IFNγ的數(shù)值的變化,說明了免疫組的小鼠機(jī)體誘導(dǎo)產(chǎn)生了Th1／Th2型混合的細(xì)胞免疫反應(yīng),且Th1型占優(yōu)勢(shì)地位。ELISA結(jié)果顯示,重組蛋白SjGCP—GST和Sj28GST引起了小鼠機(jī)體較為強(qiáng)烈的體液免疫應(yīng)答,抗體類型主要是IgG。本實(shí)驗(yàn)說明了重組蛋白SjGCP和Sj28GST免疫保護(hù)效果是細(xì)胞免疫和體液免疫共同作用的結(jié)果。本文數(shù)據(jù)為抗日本血吸蟲病疫苗