簡介：點擊查看更多玻璃化凍存對兔關節(jié)軟骨細胞存活率及生物學活性的影響.pdf精彩內容。

簡介：第四軍醫(yī)大學碩士學位論文人骨巨細胞瘤細胞系GCT0404的建立和生物學特性研究姓名張強申請學位級別碩士專業(yè)外科學（骨外）指導教師范清宇20060501

簡介：重慶醫(yī)科大學碩士學位論文外源性HBMP2、3、6和12對骨肉瘤細胞的生物學作用研究姓名何煥玲申請學位級別碩士專業(yè)腫瘤學指導教師周蘭20060501重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文英文縮寫英文全稱ABCADBMPSADGFPALPAOAPAPCBMPRIABMPSBMPSCMSBSACDK2DDABDNADNTPEBECLEDTAEGFPERKFGFGFPGFPCMH符號說明ANTIBIOTINBIOEPIDERMOXIDASERECOMBINATIONADENOVIRUSBONEMORPHOGENETICPROTEINSRECOMBINATIONADENOVIRUSGREENFLUCORESCENTPROTEINALKALINEPHOSPHATASEACRIDINEORANGEAMMONIUMPERSULPHATEANTIGENPRESENTINGCELLBONEMORPHOGENETICPROTEINRECEPTORTYPEIABONEMORPHOGENETICPROTEINSBONEMORPHOGENETICPROTEINSCONDITIONEDMEDIUMSBOVINESERUMALBUMINCYCLIN1EPENDENTKINASES一2DAYDIAMINOBENZIDINEDEOXYRIBONUCLEICACIDDEOXYRIBONUCLEOSIDETRIPHOSPHATEETHIDIUMBROMIDEEILLLANCEDCHEMILUMINESENCEETHYLENEDIAMINETETRAACETICACIDENHANCEDGREENFLUORESCENTPROTEINEXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINASEFIBROBLASTGROWTHFACTORGREENFLUCORESCENTPROTEINGREENFIUCORESCENTPROTEINCONDITIONEDMEDIUM中文全稱卵白素一生物素一過氧化酶表達骨形成蛋白的重組腺病毒表達綠色熒光蛋白的重組腺病毒堿性磷酸酶吖啶橙過硫酸銨抗原提呈細胞骨形成蛋白受體IA骨形成蛋白骨形成蛋白條件培養(yǎng)液牛血清白蛋白周期素依賴性蛋白激酶2天二氨基聯(lián)苯胺脫氧核糖核酸脫氧核苷三磷酸溴化乙啶增強型化學發(fā)光乙二胺四乙酸增強型綠色熒光蛋白細胞外信號調節(jié)性激酶成纖維細胞生長因子綠色熒光蛋白綠色熒光蛋白條件培養(yǎng)液

簡介：第一部分納米細菌的培養(yǎng)、收獲與鑒定目的探討納米細菌的培養(yǎng)和收獲方法，檢測培養(yǎng)過程中物質消耗情況和生長速度變化，鑒定培養(yǎng)后的納米細菌。方法在納米細菌的培養(yǎng)過程中，尋找培養(yǎng)的適宜條件，防污染及收獲方法。用全自動生化儀動態(tài)檢測培養(yǎng)上清液中電解質和葡萄糖的變化情況。使用酶標儀動態(tài)檢測納米細菌的吸光度值，間接了解其生長速度。通過使用納米細菌單克隆抗體進行免疫熒光試驗鑒定培養(yǎng)的納米細菌和利用電鏡進一步觀察其形狀。結果納米細菌適宜的培養(yǎng)條件是使用細胞培養(yǎng)方法，含10％FBS的完全培養(yǎng)基，加入納米細菌后，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱設置為37℃，5％C02和95％空氣培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中采用一系列措施可有效地避免納米細菌污染。培養(yǎng)的納米細菌用細胞刮子刮離瓶底，吸入離心管中，4℃離心45分鐘，將細菌粉末20℃保存，可以較好地收獲納米細菌。培養(yǎng)過程中，上清液中的K、NA、CL、MG及葡萄糖的濃度無明顯變化P005，而CA、P進行性減少，每周檢測結果比較差異有顯著性P005。結論納米細菌可以損傷內皮細胞；短時間內24小時被攻擊內皮細胞的死亡方式是壞死而不是凋亡；高濃度的納米細菌會造成內皮細胞更嚴重的損傷。

簡介：樹突狀細胞（DENDRITICCELLS，DC），是體內已知功能最強的專職抗原遞呈細胞（ANTIGENPRESENTINGCELLS，APC），是免疫應答的中心環(huán)節(jié)，不僅能活化初始T細胞啟動免疫應答，還能誘導免疫耐受負向調節(jié)免疫，有雙重調節(jié)免疫反應維持免疫平衡的作用。DC的最終免疫效應取決于其發(fā)育階段及所處的免疫微環(huán)境。免疫微環(huán)境不僅為免疫應答提供反應場所，還通過調控免疫細胞的分化發(fā)育和功能來調節(jié)免疫應答。肺臟通過氣道與外界相通，每天都要接觸大量外界抗原卻能維持免疫平衡，可見肺臟有精確的免疫調控機制，我們通過實驗證實了肺臟基質細胞微環(huán)境對免疫細胞DC的分化發(fā)育及功能有調節(jié)作用，這與維持免疫平衡有密切關系。目的觀察小鼠肺臟基質細胞微環(huán)境對骨髓來源成熟樹突狀細胞分化發(fā)育及功能的影響，并探討其影響機制。方法通過小鼠肺臟組織原代培養(yǎng)建立一株成纖維樣基質細胞系，并從細胞形態(tài)及波形蛋白表達上給予鑒定，認為原代培養(yǎng)的肺臟基質細胞具備成纖維樣細胞的特點。通過RTPCR方法檢測肺臟基質細胞高分泌兩種抑制性細胞因子TGFΒ、VEGF。此基質細胞培養(yǎng)上清與完全培養(yǎng)基以11的比例混合后用于培養(yǎng)成熟樹突狀細胞，一周后成熟樹突狀細胞被誘導成具有獨特生物學特性的調節(jié)性樹突狀細胞（DCREG）。HE染色后觀察細胞形態(tài)特征，特異性夾心酶聯(lián)免疫法檢測培養(yǎng)上清細胞因子（IL10和IL12P70）的含量，流式細胞術檢測細胞表型表達水平及吞噬能力，MTT法檢測DCREG誘導同種異體T增殖能力。將上述檢測結果與成熟樹突狀細胞進行比較，觀察誘導前后樹突狀細胞的區(qū)別。結果調節(jié)性樹突狀細胞（DCREG）分泌的細胞因子IL10高于成熟樹突狀細胞組（P005）而其誘導同種異體T增殖能力明顯低于成熟DC組（MDC）。結論我們首次證實了肺臟基質細胞微環(huán)境可誘導成熟樹突狀細胞分化發(fā)育為另一種生物學特性不同的DC亞群一調節(jié)性樹突狀細胞（DCREG），其有抑制同種異體T細胞增殖進而誘導免疫耐受負向調節(jié)免疫的作用。明確了解肺臟的免疫調節(jié)機制對預防和治療呼吸系統(tǒng)的過敏性疾病有很大的幫助。

簡介：南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文吉西他濱對CD34CD38一髓系白血病干細胞的生物學效應BIOLOGICALEFFECTOFGEMCITABINEONCD34CD38。MYELOIDLEUKEMIASTEMCELLSLEREMTATEMCELLS課題來源國家自然科學基金30973454學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院韓慧娟郭坤元教授內科血液病學專業(yè)型碩士第二臨床醫(yī)學院2013年3月30日廣州摘要胞表型的細胞株，可以應用于對白血病干細胞的研究。具有CD34CD38一表型的KGLA細胞對化療藥物耐藥并抵抗自然殺傷細胞殺傷作用。因此，本研究擬以處于分化早期階段的急性髓系白血病KGLA細胞作為研究的靶細胞。吉西他濱GEMCITABINE，GEM結構為27一脫氧一2’，27一鹽酸二氟胞苷B2異構體，在結構上與阿糖胞苷CYTARABINE，ARAC相似，系阿糖胞苷27一碳上的氫和羥基被雙氟取代，是一種新型嘧啶類核苷酸抗代謝腫瘤藥物，并且還屬于細胞周期特異性抗癌藥。其主要作用于細胞S期，也可以阻止G。期細胞向S期的進展，以此來影響細胞周期重分布，使周期敏感細胞成分增加?，F已證實該藥目前廣泛應用于非小細胞肺癌、胰腺癌和乳腺癌等實體瘤治療。GEM在惡性血液系統(tǒng)疾病方面的應用，國外開展了GEM治療難治性淋巴瘤及多發(fā)性骨髓瘤的臨床試驗，均取得較好的療效。而應用于白血病的治療僅限于基礎研究階段。目前生物免疫治療是繼手術、化療、放療之后的一種新型治療方法。免疫治療具有抗原識別的靶向性和時空效應性，是以白血病干細胞為靶的治療的根據。固有免疫效應細胞治療屬于生物治療的一種，其作用機制與化學治療不同，不存在耐藥性問題。自然殺傷NATURALKILL，NK細胞是固有免疫的主要效應細胞，具有免疫監(jiān)視作用，可以清除HLA缺失的腫瘤細胞，決定腫瘤細胞被免疫效應細胞殺傷敏感性主要來自HLAKIR的錯配程度和活化性配體NKG2DMICA、MICB、ULBPL、ULBP2、ULBP3的表達水平。靜息狀態(tài)NK細胞受到腫瘤細胞表面NKG2D配體激活，具有殺傷功能，在體外激活后可直接輸注應用。通常白血病干細胞處于靜息狀態(tài)，內外源凋亡系統(tǒng)處于關閉狀態(tài)，表面免疫激活分子低表達。研究顯示，多酚類植物單體能分別激活白血病、淋巴瘤腫瘤干細胞表達MICA／B或ULBP分子，激活NK細胞；可調節(jié)CSC外源性凋亡受體DR、DCR、CASAPSE一8的表達，使其成為殺傷敏感細胞。不同的細胞因子可以促進NK細胞增殖，而GEM是否能調節(jié)具有白血病干細胞特性的CD34CD38一早期急性髓系白血病KGLA細胞被機體免疫細胞對其的殺傷敏感性呢將是本實驗研究的重點。因此，本實驗以具有白血病干細胞特性的CD34CD38一早期急性髓系白血病TT

簡介：研究生個人簡介姓名陳洪福性別男年齡28歲學習及工作經歷時間單位及職務201007畢業(yè)于濰坊醫(yī)學院臨床醫(yī)學專業(yè)，獲醫(yī)學學士學位201009考入徐州醫(yī)學院攻讀神經外科碩士學位研究生期間臨床、科研成果及獲獎情況時間項目2011年臨床培訓12個月2012年通過國家執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格考試，通過CET62013年研究生期間修滿32學分，核心期刊發(fā)表文章一篇徐州醫(yī)學院碩士學位論文縮略詞ACR陋BCPBISBSACCK8DDH20DMEMDMSOFBS剛NBTNCODOEPAGEPBSPMSFRPMISDSSIIINAACRYLAMIDE縮略詞表英文全稱ALKALINEPHOSPHATASE5BROMODCHLORO3INDOLYLPHOSPHATEBISACRYLAMIDEBOVINESEIUMALBUMINCELLCOUNTINGKIT8DOUBLEDISTILLEDWATERDULBECCO’SMODIFIEDEAGLEMEDIADIMETHYLSULFOXIDEFETALBOVINESERULNFIBRONEETINNITROBLUETETRAZOLIUMNITROCELLULOSEOPTICALDENSITYOVEREXPRESSIONPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPHENYLMETHYLSULFONYLFLUORIDEGOSWELLPARKMEMORIALINSTITUTESODIUMDODCCYLSULFATESMALLINTERFERINGRNA中文全稱丙烯酰胺單體堿性磷酸酶5溴_4氯3吲哚磷酸丙烯酰胺雙體牛血清白蛋白細胞增殖檢測試劑盒雙蒸水DULBECCO改良培養(yǎng)基二甲基亞砜胎牛血清纖維連接蛋白氮蘭四唑硝酸纖維素光密度過表達聚丙烯酰胺凝膠電泳磷酸鹽緩沖液苯甲基磺酰氟洛斯維公園紀念研究所十二烷基磺酸鈉小干擾RNA

簡介：南昌大學醫(yī)學院碩士學位論文SIRNA沉默P62基因對人肝癌細胞HEP3B的生物學影響姓名羅小洋申請學位級別碩士專業(yè)內科學指導教師張吉翔20100501ABSTRACTABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEBIOLOGICALEFFECTSONHEPATOMACELLHEP3BOFP62BYUSEOFP62SIRNAMETHODSTHESIRNASWERETRANSFECTEDINTOHEPATOMACELLHEP3BWITHLIPOFECTAMINE2000FIRST，THEBESTSIRNASEQUENCEWHICHSILENTP62WASSELECTEDFROMTHREESIRNASEQUENCESSPECIFICALLYTARGETINGP62NAMEDASSIHGTF2H1001，SIHGTF2H1002ANDSIHGTF2H1_003THEN，THEEXPREMENTWERECLASSIFIEDFOURGROUPS1BLANKCONTROLGROUP2SIRNAGROUP3NCONTROLNCGROUP4LIPOFECTAMINELIPGROUPTHEEXPRESSIONOFP62，XPD，P53，CYCLINDLWEREDETECTEDBYRTPCRANDWESTERNBLOTTHECELLCYCLEWEREEXAMINEDBYMTTRESULTSTHEBESTSIRNASEQUENCEWHICHSILENTP62WASSIHGTF2H1002CONTRASTWITHBLANKCONTROLGROUP，NCGROUPANDLIPGROUP，THEEXPRESSIONOFP62MRNAWASDECREASEDSIGNIFICANTLYINSIRNAGROUPPO01；THEEXPRESSIONOFXPDMRNAANDP53MRNAWEREDECREASEDOBVIOUSLY；BUTTHEEXPRESSIONOFCYCLIND1MRNAWASENHANCEDOBVIOUSLYTHETRENDSOFPROTEINWASCONSISTENTWITHMRNAMTTRESULTSSHOWEDTHATCELLPROLIFERATIONINCREASEDINSIRNAGROUPCONCLUSIONP62GENEMAYINITERACTWITHXPD，P53ANDCYCLIND1TOINHIBITCANCERCELL，ANDPOSSIBLYREGULATECELLPROLIFERATIONTHROUGHDNADAMAGECHECKPOINTKEYWORDSHEPATOMACELL；SMALLINTERFERENCERNAS；GENE；P62；TRANSFECTION；CELLCYCLE

簡介：Y．T79295主學校代碼10610學號B0207T7四川大學口腔醫(yī)學博士專業(yè)學位論文磁勝附著體模擬靜磁場對人牙齦成纖維細胞題目和人牙周膜成纖維細胞的生物學效應研究作者楊凌專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師姓名巢永烈教授二OO五年四月二}J日四川大學華西口腔醫(yī)學院博士專業(yè)學位論文縮略詞HGFHPDLFALPDMS0FCMPIMMCNMPALMFAEBSODMDA英文縮略詞表英文全稱HUMANGINGIVALFIBMBLASTHUMANPERIODONTALLIGAMENTFIBROBLASTALKALINEPHOSPHATASE3水，5DIMETHYLTHIAZOL一2一Y1一2，5DIPHENYLTETRAZOLIUMBROMIDEDIMETHYLSULFOXIDEFLOWCYTOMETRYPROLIFERATIONINDEXMITOMYCINNORMALMELTINGPOINTAGAROSELOWMELTINGPOINTAGAROSE蹦DIUMBROMIDESUPEROXIDEDISMUTASEMALEIEDIALDEHYDE中文名稱人牙齦成纖維細胞人牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶34，5一二甲基噻唑一2一2，5一二苯基四氮唑嗅鹽商品名噻唑監(jiān)二甲亞砜流式細胞術增殖指數絲裂霉素常熔點瓊脂糖低熔點瓊脂糖溴化乙啶超氧化物歧化酶丙二醛

簡介：目的1、分離、培養(yǎng)小鼠骨髓間充質干細胞MMSCS，確保其良好的增殖能力和多向分化潛能，研究其生物學特征，并對相關生物學特性進行初步研究，為其后應用于動物模型做準備。2、制備RAAV1EGFP載體。觀察其感染染小鼠骨髓間充質干細胞MMSCS及對MMSCS生物學特性的影響，并證實該病毒載體可高效轉染MMSCS并獲得高效穩(wěn)定的體外表達，以符合體內實驗要求方法1、沖洗小鼠長骨后，I型膠原酶消化長骨碎片，PBS洗凈骨片后完全培養(yǎng)基接種骨片。靜置3天，換液去除骨碎片及未貼壁細胞。后每3天換液。細胞融合度達70％80胰酶消化，按4103CM2密度接種培養(yǎng)。觀察MMSCS生長特點、表面特異性標記、多向分化潛能的變化情況。2、采用PEI轉染法將三質粒PTREGFP，PXR1，PXX680共轉染293T細胞，包裝RAAV1EGFP，通過氯化銫密度梯度離心純化獲得RAAV1EGFP通過實時定量PCR檢測病毒滴度。3、采用不同滴度RAAV1EGFP感染MSCS，需找合適的感染復數。觀察轉染后MMSCS生長特點、表面特異性標記、多向分化潛能的變化情況。觀察RAAV1EGFP轉染對于MMSCS生物學特性的影響。結果1、收集小鼠骨片培養(yǎng)，經傳代培養(yǎng)3代以上后細胞呈現為均質性較好的短梭形細胞。細胞匯合80?時G0G1期細胞百分率8377。P3P6代細胞表面抗原高表達CD29、CD44、SCA1，低表達CD45、CD31、CD34P4代細胞經體外定向誘導培養(yǎng)，可分化為成骨及脂肪細胞，證實所培養(yǎng)細胞具備多向分化潛能。2、通過實時定量PCR檢測，獲得高純度的滴度為141011VGML的RAAV1EGFP。3、RAAV1EGFP感染MMSCS最合適MOI值為105。流式細胞儀檢測RAAV1EGFP感染MMSCS48HGFP的表達率為975±05。RAAV1EGFP感染MMSCS后，MMSCS可正常貼壁，生長迅速，形態(tài)上無明顯改變，其細胞表面特異性標記及多向分化潛能未受明顯影響。結論1、通過骨片法成功分離、培養(yǎng)了正常C57BL6小鼠的骨髓間充質干細胞，生物學特性穩(wěn)定，可用于進行動物實驗。2、成功構建了重組腺相關病毒載體，并證實對其對MMSCS具有較高的轉染效率并獲得高效穩(wěn)定的體外表達，RAAV1轉染未明顯影響MMSCS的生物學特性。

簡介：四川大學碩士學位論文口腔癌相關成纖維細胞的分離培養(yǎng)及其生物學特性研究姓名劉英申請學位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師周紅梅20030506口巍掌項慚專AT麟T論炎THESTUDIESONSEPARATIONANDCULTUREANDBIOLOGICCL|囂|建E￡ERISTIESOFTHEORALCARCINOMA。ASSOCIATEDFIBROBLASTSPOSTGRADUATELIUYINGTUTORASSOCIATEPROFZHOUHONGMEIABSTRACTBAEKGROUNDTHEMECHANISMSOFTHEOCCURRENCEANDEVOLUTIONOFSQUAMOUSCARCINOMAHAVEN’TBEENCLARIFIEDYETINTHEPAST，MANYSTUDIESONLYFOCUSEDONTHECHANGESOFEPITHELIUMORMESENCHYMEBUTNEGLECTINGTHEIMPORTANTINTERACTIONSBETWEENTHEEPITHELIUMANDMESENCHYMETHISSUBJECTINTENDEDTOAPPLYTHERTEWTHEORYOFMICROECOLOGYOFTHETUMORHOSTINTERFACETOTHEFIELDOFTHEORALMUCOSACARCINOGENESIS，THEMAJORADJUSTMENTFACTORASCARCINOMAASSOCIATEDFIBROBLASTSCAFSWASSELECTEDASTHERESEARCHTOPIC。HOWEVERRTORELATEDPAPERSABOUTORALCAFSWEREREPORTEDPURPOSE①TOSEPARATEANDCULTUREANDV蘸FYTHEORALCAFSPRELIMINARY②TOSTUDYTHEMAINBIOLOGICCHARACTERISTICSOFTHEORALCAFSMETHODSTHEPRIMARYCAFSANDNFSWEREOBTAINEDBYTISSUECULTURE，CELLSWEREPASSAGEDBYO。25％TRYPSINANDPURIFIEDBYCURAGEMETHODANDTRYPSINIZATION；蟄TOVERIFYTHECELLSPRELIMINARILYACCORDINGTOTHECHANGESOFMORPHOLOGYANDTHEEXPRESSIONOFTHECERTAINPROTEINS；③TOCOMPARETHECAFSWITHNFSOFTHEIRBIOLOGICCHARACTERISTICS，SUCHASPROLIFERATIONANDMOTILITYANDKARYOTYPEETCRESULTSTHEORALCAFSWERESUCCESSFULLYSEPARATEDANDCULTUREDANDVERIFIEDPRELIMINARILY；②COMPARETOTHENORMALFIBROLASTSFROMORALMUCOS如THEPROLIFERATIONANDMOTILITYOFTHEORALCAFSINCREASEDSIGNIFICANTLYHOWEVERTHEBASICCHARACTERISTIESOFTHENOLTNALCELLSWEREKEPTINTHEORAL2

簡介：軍醫(yī)進修學院解放軍總醫(yī)院博士學位論文慢病毒介導的RNAI沉默HOXB13基因對前列腺癌LNCAP細胞生物學行為影響的研究姓名李巖密申請學位級別博士專業(yè)影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師唐杰羅渝昆20090531軍醫(yī)進修學院博學位論文3．經直腸超聲引導下穿刺活檢，收集前列腺癌組織及癌旁組織，提取RNA，逆轉錄為CDNA后，實時定量PCR法檢測前列腺癌及癌旁組織中HOXBL3基因的表達；分析HOXBL3基因與患者的生存PSA表達的相關性。結果1．根據人HOXBL3基因序列，選擇4個靶點，設計合成了4條寡核苷酸模板，成功構建了4條HOXBL3SHRNA慢病毒載體質粒，經測序鑒定插入片段序列與預期序列一致。293FT細胞包裝構建成功重組質粒載體，生產出慢病毒顆粒，并進行濃縮。2．將HOXB3SHRNA轉染前列腺癌細胞株LNCAP，發(fā)現LNCAP蛋白質表達顯著降低，表明采用的干擾片段有效。HOXBL3沉默使前列腺LNCAP細胞的生長加快和遷移細胞數目增加。3．HOXBL3基因在前列腺癌及癌旁組織中均有表達，癌組織CT值高于癌旁組織。結論成功構建了4條HOXBL3特異性SIRNA慢病毒表達載體。利用構建的重組慢病毒表達載體產生的慢病毒成功感染了前列腺癌細胞株LNCAP，HOXBL3沉默使前列腺LNCAP細胞的加快和遷移細胞數目增加。HOXBL3基因在前列腺癌及癌旁組織中的表達有差異。檢關鍵詞前列腺癌；HOXBL3基因；RNAI；慢病毒載體；經直腸超聲前列腺穿刺活4

簡介：”LF夕後翌大學博士學位論文色素上皮衍生因子對黑素細胞生物學活性的影響EFFECTOFPIGMENTEPITHELIUMDERIVEDFACTOR0NHUMANMELANOCYTES院系專業(yè)姓名指導教師導師組成員華山醫(yī)院皮膚病與性病學張成鋒鄭志忠教授項蕾紅教授祝祿川技師二零零八年五月英文縮略語英文縮略語英文縮略語英文全稱ABEAVIDINBIOTINPEROXIDASECOMPLEXAGEBFGFBPBSADABDHANKSDMSOEDTAFCSGAPDHHGFHRPILIBMXMB廿MLVLMMMMPMRNAMRRNTODPBSPDGFPEDFPIGFADVANCEDGLYCATIONENDPRODUCTSBASICFIBROBLASTICGROWTHFACTORBASEPAIRBOVINESERUMALBUMINDIAMINOBENZIDINECA2／MG_FREEHANK’SBALANCEDSALTHANKSSOLUTIONDIMETHYLSULFOXIDEETHYLENEDIAMINETETRAACETICACIDFETALCALFSERUMGLYCERALDEHYDES3PHOSPHATEDEHYDROGENASEHEPATOCYTEGROWTHFACTORHORSE戌IDISHPEROXIDASEINTERLEUKIN3ISOBUTYL1一METHYXANTHINGEMITOGENACTIVATEDPROTEINMILLIMOLPERLITERMALIGNANTMELANOMAMATRIXMETALLOPROTEINASCSMESSENGERRIBONUCLEICACIDMETHYLTHIAZOLETRAZOLIUMNUCLEOTIDEOPTICALDENSITYPHOSPHATEBUFFERSALINEPLATELETDERIVEDGROWTHFACTORPIGMENTEPITHELIUMDERIVEDFACTORPLACENTAGROWTHFACTOR中文譯名抗生物素生物素過氧化酶復合物糖化反應終產物堿性成纖維細胞生長因子堿基對牛血清白蛋白二氨基聯(lián)苯胺無鈣、鎂的平衡鹽溶液二甲基亞砜乙二胺四乙酸胎牛血清甘油醛3磷酸去氫酶肝細胞生長因子辣根過氧化物酶白細胞介素異丁甲基黃嘌呤促分裂原活化蛋白毫摩爾每升惡性黑素瘤金屬蛋白酶信使核糖核酸四甲基偶氮唑藍核苷酸光密度磷酸緩沖鹽溶液血小板源性生長因子色素上皮衍生因子胎盤生長因子

簡介：本文主要從以下幾個部分展開論述第一部分基質金屬蛋白酶酶解控釋血管內皮生長因子聚乙二醇水凝膠制備與鑒定第一節(jié)四枝化狀丙烯?；垡叶嫉暮铣膳c鑒定目的運用接枝聚合方法制備四枝化狀丙烯?；垡叶?BRANCHEDPEGDA并鑒定其化學結構及屬性是否符合實驗設計要求。方法以分子量20000DA線性聚乙二醇PEG單體為原料通過四步合成方法在單體末端引入四個丙烯?；p鍵官能團。經紅外光譜、1H核磁波譜、高效液相色譜、基質輔助激光解吸電離及凝膠過濾色譜檢測聚合物產品在分子結構、目標官能團置換度、終產物產率、分子量及產物純度方面是否符合實驗設計、滿足后續(xù)實驗要求。結果自制4BRANCHEDPEGDA產物經紅外光譜、1H核磁共振檢測證實分子結構與設計相符、末端雙鍵官能團置換度963％高效液相色譜檢測顯示產物純度為984％基質輔助激光解吸電離檢測提示產物實際平均分子量與設計結構分子量相符凝膠過濾色譜檢測結果顯示產物多分散性數值為102產物分子量均一純度較高。結論通過接枝聚合方法制備4BRANCHEDPEGDA在分子結構、目標官能團置換度、終產物產率、分子量及產物純度方面均符合實驗設計、滿足后續(xù)實驗要求。第二節(jié)基質金屬蛋白酶酶解控釋血管內皮生長因子聚乙二醇水凝膠制備及釋藥性能研究目的制備基質金屬蛋白酶酶解控釋血管內皮生長因子聚乙二醇水凝膠VEGFMMP多肽PEGGEL觀察其形貌結構并研究酶解控釋效應為后續(xù)實驗奠定基礎。方法運用9芴甲氧羰基FMOC多肽固相法合成含有巰基SH的基質金屬蛋白酶MATRIXMETALLOPROTEINASEMMP底物多肽。利用4BRANCHEDPEGDA與血管內皮生長因子165VULARENDOTHELIALGROWTHFACT165VEGF165共價結合后根據MICHAEL加成反應原理與含有巰基的MMP底物多肽結合生成VEGF載藥聚乙二醇水凝膠VEGFMMP多肽PEGGEL。通過大體形態(tài)及掃描電鏡觀察VEGFMMP多肽PEGGEL形貌及微觀結構。運用酶聯(lián)免疫吸附測定ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAYELISA研究基質金屬蛋白酶2MMP2與VEGFMMP多肽PEGGEL之間酶解釋藥的關系。結果室溫下VEGFMMP多肽PEGGEL大體形態(tài)為透明果凍狀。經掃描電鏡觀察水凝膠表面微觀形態(tài)呈網狀。其中對MMP敏感的VEGFMMP多肽PEGGELVEGFMMPWXPEGGEL表面孔隙平均直徑為0251±0101UM孔隙率為101±121％。ELISA檢測結果顯示VEGFMMP多肽PEGGEL對VEGF165包封率為8433±118％。凝膠形態(tài)崩解時相及ELISA檢測結果顯示在不同濃度MMP2作用下VEGFMMPWXPEGGEL具有穩(wěn)定的VEGF釋放速率。結論通過MICHAEL加成反應制備的VEGFMMPWXPEGGEL與MMP2具有穩(wěn)定的控釋關系滿足后續(xù)實驗要求。第二部分VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架制備及體外生物相容性研究第一節(jié)VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架的制備與鑒定目的制備VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架并通過形態(tài)學觀察和免疫熒光染色鑒定是否成功構建復合支架。方法運用生物素SULFONHSSSBIOTIN修飾去細胞瓣支架行免疫熒光染色鑒定。根據親和素生物素結合原理將含有生物素的VEGF控釋水凝膠VEGFBIOMMPWXPEGGEL與去細胞瓣支架復合行HE染色和掃描電鏡觀察。結果結合生物素的去細胞瓣支架經攜帶CY3熒光親和素染色熒光顯微鏡顯示瓣膜基質呈紅色。形態(tài)學觀察顯示水凝膠去細胞瓣復合支架具有去細胞瓣三層基質結構和凝膠規(guī)則網狀孔隙微觀結構。結論按實驗設計成功制備VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架。第二節(jié)VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架體外生物相容性研究目的參照GBT1688國家標準體外研究VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架生物相容性。方法參照GBT1688國家標準對復合支架進行血液相互作用實驗研究其對血小板激活、凝血時間、溶血的影響對復合支架及其浸提液進行細胞毒性實驗研究其對細胞增殖與凋亡的影響。結果經掃描電鏡流式細胞儀檢測證實復合支架可減少去細胞瓣對血小板的粘附與激活經PTAPTTINR檢測證實復合支架對凝血時間無明顯影響經間接、直接溶血實驗證實復合支架溶血率低于GBT16886國家標準經細胞增殖、凋亡檢測證實復合支架及其浸提液對MRC5人胚肺細胞無明顯影響。結論參照GBT1688國家標準VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架具有良好的生物相容性。第三部分智能水凝膠去細胞瓣復合支架制備及體內生物學性能研究第一節(jié)智能水凝膠去細胞瓣復合支架的制備與鑒定目的制備抗CD34抗體VEGF控釋水凝膠去細胞瓣復合支架智能水凝膠去細胞瓣復合支架并通過免疫熒光染色鑒定是否成功構建復合支架方法運用生物素SULFONHSSSBIOTIN修飾去細胞瓣支架。根據親和素生物素結合原理將VEGFBIOMMPWXPEGGEL與去細胞瓣支架復合。同樣原理將經生物素化抗CD34抗體與水凝膠去細胞瓣支架復合行免疫熒光染色鑒定。結果結合抗CD34抗體水凝膠去細胞瓣復合支架經FITC標記抗IGG抗體染色熒光顯微鏡顯示瓣膜基質呈綠色。結論按實驗設計成功制備智能水凝膠去細胞瓣復合支架。第二節(jié)智能水凝膠去細胞瓣復合支架體內生物學性能研究目的建立兔頸動脈瓣膜管道移植模型評估智能水凝膠去細胞瓣復合支架體內生物學性能方法運用改良兔頸動脈“CUFF”套管技術建立兔頸動脈瓣膜管道移植模型。分別于術后24小時和7天通過多普勒彩色超聲檢測管道通暢與否判斷動物模型建立是否成功。術后24小時取出移植物根據組織形態(tài)學檢測評估移植管道對CD34細胞的粘附能力。術后7天取出移植物根據組織形態(tài)學檢測及ENOSMRNA定量分析評估移植管道內皮化程度。結果超聲結果顯示移植管道通暢兔頸動脈瓣膜管道移植模型建立成功。術后24小時相應檢測結果顯示本實驗制備復合支架對CD34細胞有明顯的粘附能力。術后7天相應檢測結果顯示本實驗制備復合支架內皮化程度優(yōu)于對照組支架。結論智能水凝膠去細胞瓣復合支架具有優(yōu)良的生物學性能。

簡介：授予單位代碼學號或申請?zhí)?045905220101級公開文學論大位州學鄭士博論文題目作者姓名沉默核干細胞因子對食管癌細胞生物學特性的影響張功員學科門類專業(yè)名稱導師姓名、職稱醫(yī)學病理學與病理生理學張欽憲教授2008年12月鄭州大學2008屆博士學位論文中文摘要沉默核干細胞因子對食管癌細胞生物學特性的影響博士研究生張功員導師張欽憲教授鄭州大學基礎醫(yī)學院鄭州450052摘要中國是世界上食管癌發(fā)病率和病死率最高的國家，每年全世界新診斷的30萬食管癌患者中121672萬以上發(fā)生在中國。食管癌的浸潤轉移是引起食管癌患者死亡的主要原因，因此對食管癌發(fā)生發(fā)展、浸潤轉移機制的探討已成為研究的熱點之一。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多因素、多步驟、多階段和多基因改變的過程，癌基因和抑癌基因是受累最多的兩大類型，各種關鍵基因的改變是人類腫瘤形成和發(fā)展的基礎。近年來發(fā)現核干細胞因子NUCLEOSTERNIN，NS基因是一種新的P53結合蛋白，參與干細胞和腫瘤細胞的增殖調控，能維持細胞的擴增并抑制其向成熟細胞分化。先后發(fā)現胃癌、腎癌、乳癌、膀膚癌等腫瘤組織中NS基因表達量與腫瘤的侵襲力呈正相關，NS可能是在細胞周期的S期末和GZ期通過已知的腫瘤抑制基因P53發(fā)揮作用來調節(jié)干細胞和癌細胞的增殖狀態(tài)，NS可能是干細胞和腫瘤細胞穿越GZ從關鍵點的特異性調控因子。表皮生長因子EP記ALGROWTHFACT，EGF是近年來發(fā)現的在細胞增殖和分化中起重要作用的因子，可促進正常細胞的惡性轉化及刺激腫瘤細胞的增殖。還與腫瘤浸潤轉移密切相關。研究表明EGF是通過細胞表面的表皮生長因子受體EPIDALGROWTHFACTREC叩T，EGFR發(fā)揮其生物學效應。在許多腫瘤組織中均發(fā)現EGF及其受體EGFR的過表達且二者具有相關性。RNA干擾RNAI是多種生物體內由雙鏈RNA介導同源MRNA降解的現象。在細胞中，長的DSRNA被類似RNASEIH的DICER酶切割成21一26核普酸的小干擾RNASIRNA。RNAI基因阻斷的有效性和特異性使其可能成為疾病基因療法的理想工具。作者擬聯(lián)合檢測食管癌組織中NS、EGF、EGFR的表達，構建針對NS基因的SIRNA真核表達載體，轉染食管癌EC9706細胞株，觀察EC9706細胞生物學特性的變化及NS基因沉默對裸鼠移植瘤生長的影響。全文共分3部分，摘要分述如下。