siRNA沉默p62基因?qū)θ烁伟┘?xì)胞Hep3B的生物學(xué)影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:應(yīng)用siRNA沉默人肝癌細(xì)胞Hep3B中p62基因的表達(dá),探討p62基因?qū)θ烁伟┘?xì)胞的生物學(xué)影響及其p62基因與XPD、p53及cyclinD1之間的相互關(guān)系。
　　 方法:人肝癌細(xì)胞Hep3B為靶細(xì)胞,siRNA通過(guò)Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染。首先從3條siRNA序列中篩選出1條沉默p62最佳的序列。然后將細(xì)胞分為空白對(duì)照組、siRNA組、Ncontrol(NC)組、脂質(zhì)體(Lip)組。分別用RT-PCR和W

2、estern blot法檢測(cè)各組細(xì)胞中p62、XPD、p53以及cyclinDl的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)量,并用MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化。
　　 結(jié)果:沉默p62最佳的siRNA序列為Si-h-GTF2H1_002。siRNA組中p62的mRNA表達(dá)較空白對(duì)照組、NC組、Lip組顯著性下調(diào)(P<0.01),siRNA組中XPD、p53的mRNA表達(dá)較其他3組也有明顯的下調(diào)；而siRNA組中cyclinD1的mRNA表達(dá)較其他

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