阿司匹林抗血小板聚集與抗血栓作用

1、阿司匹林抗血小板聚集及抗血栓形成的作用,,,血栓形成可導致急性心肌梗死、中風、肺栓塞等心、腦、肺循環(huán)疾病，是外科手術(shù)中常見的并發(fā)癥，也是介入性血管形成術(shù)后再閉塞的重要因素,,血小板活化在心腦血管疾病發(fā)病中占有重要地位, 抗血小板聚集藥已作為常規(guī)治療用于心腦血管疾病,Background,,,血栓形成是血液在流動狀態(tài)下, 止血機制過度激活的一種病理性結(jié)局, 是血小板、 白細胞、內(nèi)皮細胞等多細胞間相互作用的結(jié)果, 而血小板的活化和聚集是其中

2、重要因素之一。用電刺激大鼠頸動脈血栓形成, 其原理是損傷動脈內(nèi)皮, 導致其功能紊亂, 激活白細胞和血小板, 引起血小板聚集, 形成混合型血栓, 此模型重復性好, 誤差小, 與人體動脈血栓相似。,小劑量阿司匹林能明顯延長電刺激大鼠頸動脈血栓形成時間, 從而說明其有較強的抗動脈血栓形成作用.,,在正常的循環(huán)血液中, 血小板處于靜息狀態(tài),而在某些生理或病理狀態(tài)下, 血小板可以被激活。血小板激活是指血小板在刺激物(誘導劑) 作用下發(fā)生的

3、各種改變, 如變形、粘附和聚集等, 其中血小板的活化聚集是血小板的重要改變形式。,,阿司匹林已應用百年，成為醫(yī)藥史上三大經(jīng)典藥物之一，至今它仍是世界上應用最廣泛的解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎藥，也是作為比較和評價其他藥物的標準制劑。在體內(nèi)具有抗血栓的作用，它能抑制血小板的釋放反應，抑制血小板的聚集 臨床上用于預防心腦血管疾病的發(fā)作。,aspirin,,血小板活化聚集,AA 途徑,ADP途徑,PAF途徑,阿司匹林,TXA2,腺苷酸環(huán)化酶,cAMP,促

4、進血小板聚集,花生四烯酸,,環(huán)氧化酶,PGG2,PGH2,,,PGF2?,PGE2,還原酶,異構(gòu)酶,,前列環(huán)素合成酶,PGI2,,血栓烷合成酶,阿司匹林,,,腺苷酸環(huán)化酶,,cAMP,,,抑制血小板聚集,,,,,(-),?,,(-),,,研究和開發(fā)療效好，新型的抗血栓藥物是當代醫(yī)藥界的重要任務之一,作為預防血栓性疾病一線用藥。選用何種劑量較為合適, 一直是臨床爭論的問題。,阿司匹林,,,,驗證阿司匹林抗血小板的聚集及抗血栓作用,探討阿司

5、匹林的臨床治療量，指導臨床用藥,Purpose,Reagents and Instrument,阿司匹林( aspirin, ASP) 結(jié)晶花生四烯酸( arachidonicacid, AA )血小板活化因子( platelet activating factor,PAF) 腺苷二磷酸( adenosine diphos2phate, ADP)戊巴比妥鈉,三道電子刺激器，超聲血液流量計，四道血液凝聚儀，離心機,電

6、刺激大鼠頸動脈血栓形成,雄性SD大鼠40只, 隨機分成4組, 每組10只。A 組: 0.19 % NS 作為空白對照組; B-D組:10、20和30 mg/kgASP組。大鼠用30mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后,上述各組份均以0.11mL/100g體重大鼠股靜脈注射.給藥后15min,分離大鼠左頸總動脈, 置兩根銀制電極,超聲探針置遠心端, 用電刺激器以115mA的直流連續(xù)刺激大鼠頸動脈7min, 用超聲血流量儀記錄血栓形成時間(

7、即從刺激開始至頸動脈血流量為“零”的時間, occlusion time, OT)。觀察刺激開始后60min內(nèi)的血流量變化, 如血管仍未栓塞,則以60min作為最大OT。,血小板聚集體內(nèi)試驗,健康家兔40只, 隨機分成4組, 每組10只。A 組: 0.19 % NS 作為空白對照組; B-D組:10、20和30 mg/kgASP組。給藥前取血1次, 然后按上述分組分別沿兔耳緣靜脈給藥后, 分別于30、60、120 和180 min取血

8、。各時間點所取血液用3.5mg/mL肝素抗凝(血與抗凝劑的體積比為9: 1),收集于塑料離心管中, 以900×g離心9min, 取上層液即為富血小板血漿(platelet-rich plasma, PRP),剩余血液繼以25000×g離心10 min取上層液得貧血小板血漿(platelet-poor plasma PPP)。,實驗過程中, PRP中的血小板數(shù)應控制在約5 ×108 cell / mL。按Bo

9、rn比濁法進行血小板聚集性測定, 用PPP 300μL 調(diào)零, 于比濁管中加入PRP 300μL,分別加入3 種誘導劑:AA終濃度0.35 mmol/L, ADP終濃度3μmol/L,PAF終濃度7.2nmol/L, 并記錄300s內(nèi)最大聚集率。,Results,ASP對電刺激大鼠頸總動脈血栓形成的影響　( x ±s n = 10),ASP對ADP、AA、PAF誘導血小板聚集的影響( x ±s, n = 10),臨床

10、試驗設計,1 人體內(nèi)血栓形成很難直接觀察到, 從而給血栓及抗血栓的研究和疾病的防治帶來困難。通過模擬血栓狀況來判斷心腦血管疾病發(fā)病期間患者體內(nèi)血栓形成與栓塞程度, 以此來預測心腦血管疾病前期(潛伏期) 體內(nèi)隱性血栓的存在和發(fā)展, 其臨床意義是十分明顯的。本實驗用CAST儀形成的體外血栓與體內(nèi)血栓有十分相似的結(jié)構(gòu), 可分為頭體尾三部分。血栓指數(shù)Q值下降是因為小劑量阿司匹林使血小板內(nèi)血栓素(TXA2)的生成減少，從而抗血栓形成。,,2

11、血小板聚集率是間接反應血小板代謝所產(chǎn)生的TXA2的含量與血栓形成的可能性及關(guān)聯(lián)度。血栓形成是反映血液在循環(huán)中由血管壁、血小板、血細胞、纖維蛋白原及各種凝血因子在流體效應尤其是在TXA2 作用下所形成的病理性塞子以及其危險性。二者在臨床和實驗中都呈正相關(guān)。,,Materials and methods,儀器 CAST—I型體外血栓模擬儀，MG型血小板聚集儀， TX—A型天平稱一般資料 　選取符合如下條件的心腦血管疾病患者160 例

12、。無應用 ASP 禁忌證, 用藥前測定血小板聚集率> 50 %者為入選條件。,,服用指征 M—ASP：10mg／片；安慰劑：相當于l0mg／片 M— ASP大小 M—ASP服用指征：男性，血栓指數(shù)Q值40患者．每天餐后分別服用10、20、30、40、50mg；女性，血栓指數(shù)Q值8～l6者．每天餐后服用10mg，余同男性。,臨床試驗,1、血栓指數(shù)Q值：餐后2h用一次性注射器自靜脈取血l ml注入硅化硅膠管內(nèi)，置CAS

13、T 一I型血栓儀(37℃)。自控旋轉(zhuǎn)8min后止。將血栓平鋪在濾紙上，測其長度(mm)。再用濾紙吸干水分(以栓體在濾紙上無滲透為準)。用TX—A型天平稱重量(mg)。,,臨床試驗,2 血小板聚集率(PAG)；用）0.2ml枸櫞酸鈉加靜脈血1.8ml混勻。500r／min分離血小板層，用血小板聚集儀和花生四烯酸（AA）誘導劑測其1min和最大聚集率。3 統(tǒng)計學處理將服用M-ASP和安慰劑前后3、6個月的各項指標作配對比較t檢驗，并計算x

14、 ±s值。,Expected results,服M—ASP前血栓指數(shù)Q值、小板聚集率與服藥后3～6個月比較血栓指數(shù)Q值、血小板聚集率明顯下降。,Conclusion,小劑量有明顯的抗血小板聚集與抗血栓形成的作用,小劑量阿司匹林在心腦血管疾病中抗血小板療效顯著。,References,1 李家增．抗血小板藥的臨床應用[J]中國處方藥，005，(6)22 BORN G V R1Aggregation of blood p lat

15、elets by adeno2 sine diphosphate and its reversal [ J ] 1 Nature, 1962,194 (6) : 927 - 9293糜賢鳳,閉雄杰,蔣紅,等.阿司匹林與血小板抑制關(guān)系的臨床研究。臨床血液學雜志,1998,11:60-63.4 包承鑫. 抗血小板藥物研究某些進展[J ]. 中華血液病學雜志, 1990, 11 (10) : 553.5 忻偉均. 阿司匹林每日10mg