活血化瘀中藥和食物抗血小板聚集活性評價及作用機(jī)制初探.pdf

1、血栓栓塞引起的心腦血管疾病已成為臨床常見病，嚴(yán)重危害著人類的健康甚至危及生命。這類疾病的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，與凝血系統(tǒng)障礙、血液流變學(xué)異常等病理狀態(tài)息息相關(guān)，其中血小板功能異常和血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷被認(rèn)為是最重要的致病因素。血小板功能異常，使得血液中血小板聚集增多，大量不溶性血栓生成，最終堵塞血管，引起一系列血栓栓塞性并發(fā)癥。因此，抗血小板聚集藥物的研制與開發(fā)是治療心腦血管疾病有效且重要的手段之一。傳統(tǒng)中藥和日常食物因其來源廣、副作用小及療效

2、好等優(yōu)點(diǎn)，有望被開發(fā)成為預(yù)防和治療血小板聚集相關(guān)疾病的臨床藥物。本論文應(yīng)用所建立的體外抗血小板聚集實(shí)驗(yàn)方法，系統(tǒng)、全面的評價和比較了31種傳統(tǒng)活血化瘀中藥和14種日常食用食物提取物的抗血小板聚集作用，并從中選取作用最強(qiáng)的一味中藥延胡索進(jìn)行體外抗血小板聚集作用機(jī)制的初步研究。論文一共包括以下五個部分（章節(jié)）：
　　第一部分為文獻(xiàn)綜述部分，首先簡要闡述了血栓形成機(jī)制及血小板參與血栓的形成過程；然后針對天然產(chǎn)物的抗血小板聚集研究進(jìn)行了詳

3、細(xì)總結(jié)，其主要作用機(jī)制可歸結(jié)為血小板膜蛋白受體拮抗劑、影響核苷酸系統(tǒng)、抑制血小板內(nèi)含釋放物和影響花生四烯酸系統(tǒng)等四個方面；最后對中藥延胡索的化學(xué)成分和抗血小板聚集研究現(xiàn)狀進(jìn)行了簡要介紹。
　　第二部分建立了體外抗兔血小板聚集的實(shí)驗(yàn)方法，評價并比較了31種傳統(tǒng)活血化瘀中藥提取物的體外抗血小板聚集活性。首先采用溶劑回流提取法，得到每味中藥3個不同極性提取部分：水提物、90％乙醇提取物及乙酸乙酯萃取物；接著以二磷酸腺苷（ADP）、凝血酶

4、（THR）和花生四烯酸（AA）為誘導(dǎo)劑，以阿司匹林為陽性藥，相關(guān)溶劑（磷酸鹽緩沖溶液和二甲基亞砜混合溶劑）為空白對照，采用比濁法分別測定了93個提取物的血小板聚集抑制率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所建立的體外抗血小板聚集體系可快速、有效的評價中藥抑制血小板聚集的活性，其中延胡索、川芎、玄參、紅花、丹參和三七等中藥被證實(shí)具有顯著的抗血小板聚集作用，可為其開發(fā)成為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　第三部分運(yùn)用所建立的體外抗血小板聚集評價方法對14種日常

5、食用食物的水提物、90%乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物及榨汁濃縮物的體外抗血小板聚集作用進(jìn)行了測試。結(jié)果表明，食物的榨汁濃縮物抗血小板聚集作用普遍較好，百合科蔥屬植物（韭菜、大蒜、大蔥和洋蔥）和柑橘屬水果（檸檬和西柚）對三種誘導(dǎo)劑（ADP、THR及AA）誘導(dǎo)的血小板聚集均有顯著的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可為心腦血管疾病患者的日常飲食提供參考與建議。
　　第四部分選取了實(shí)驗(yàn)中抗血小板聚集作用最強(qiáng)的中藥延胡索進(jìn)行了作用機(jī)制的初步研究，主要考察了

6、延胡索提取物對血小板核苷酸系統(tǒng)（cGMP的表達(dá)）和內(nèi)含釋放物（5-HT、P-選擇素及Ca2+）的影響。結(jié)果表明，延胡索水提物對ADP、THR和AA引起的5-HT釋放有較好的抑制作用，延胡索90%醇提物對THR和AA的抑制作用比較明顯，而延胡索乙酸乙酯萃取物則沒有抑制ADP引起的5-HT釋放；延胡索水提物、90%醇提物及乙酸乙酯萃取物可以降低靜息血小板及THR活化血小板的胞漿Ca2+濃度；延胡索水提物、90%醇提物及乙酸乙酯萃取物可以抑制

7、THR引起的血小板顆粒釋放P-選擇素，其中乙酸乙酯萃取物抑制活性最強(qiáng)；延胡索水提物、90%醇提物可以升高THR活化血小板內(nèi)cGMP的含量，乙酸乙酯萃取物則沒有明顯作用。綜上所述，延胡索水提物、90%醇提物對THR誘導(dǎo)的家兔體外血小板聚集抑制作用可能是通過促進(jìn)血小板cGMP的釋放，以及抑制血小板顆粒內(nèi)含物5-HT、P-選擇素及Ca2+的釋放而實(shí)現(xiàn)的；延胡索乙酸乙酯萃取物則是通過降低THR誘導(dǎo)的血小板P-選擇素和Ca2+含量而起到抗血小板聚

8、集的作用。
　　第五部分是結(jié)論與展望，活血化瘀中藥延胡索、川芎、玄參、紅花、丹參和三七，以及百合科蔥屬植物、柑橘屬水果對ADP、THR和AA誘導(dǎo)的家兔體外血小板聚集有顯著的抑制作用；延胡索三個提取物對THR誘導(dǎo)的血小板聚集可能是通過影響血小板5-HT、Ca2+、cGMP及P-選擇素水平實(shí)現(xiàn)的。對于延胡索提取物及單體成分抗血小板聚集作用機(jī)制可以從蛋白質(zhì)組學(xué)等方面進(jìn)行深入探討，另一方面需要對抗血小板聚集活性高的中藥及食物的活性單體成分