禽戊型肝炎病毒抗體在人、豬和雞血清中的檢測與鑒定.pdf

1、戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)感染所致的急性病毒性肝炎，主要流行于亞洲、非洲和拉丁美洲等發(fā)展中國家。在我國發(fā)生的急性病毒性肝炎中戊型肝炎約占20％左右。據(jù)1992～1995年全國病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查，以抗-HEV ELISA試劑檢測，結(jié)果表明抗-HEV流行率為17.2％，因此可以推算我國至少有2.1億人感染過HEV，這使戊肝成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問題。 1997年，豬HEV在美國被發(fā)

2、現(xiàn)，2001年，禽HEV被從患有肝脾腫大(hepatitis-splenomegaly，HS)綜合癥的雞膽汁中分離出。與豬HEV不導(dǎo)致豬出現(xiàn)臨床癥狀不同，禽HEV感染雞表現(xiàn)為肝脾腫大，肝壞死，肝出血，卵巢退化，死亡率上升等。國際病毒命名委員會(huì)于2004年將禽HEV歸屬于戊型肝炎病毒屬。自禽HEV發(fā)現(xiàn)以來，對(duì)禽HEV的血清學(xué)調(diào)查已有數(shù)篇報(bào)道。如梁久紅和孟繼鴻報(bào)道我國南方雞的血清中禽HEV抗體陽性率為33％，張璐等報(bào)道健康雞禽HEV抗體陽性

3、率為28.5％，而患有肝脾腫大綜合征雞的禽HEV抗體陽性率為43.3％，Huang等對(duì)美國五個(gè)州的雞群禽HEV進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果證實(shí)，禽HEV在雞群和個(gè)雞中血清抗體陽性率分別為71％和30％，不同年齡組其抗體陽性率不同(18周齡以下為17％，成年雞為36％)。同時(shí)利用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)，從21份患有HS綜合癥的雞的膽汁中檢出12份禽HEV陽性，測序結(jié)果顯示這些流行株與標(biāo)準(zhǔn)株的同源性為79％-88％，與已知的人、豬HEV分離株的同源性為56％

4、-61％。這些檢測調(diào)查結(jié)果證明了禽與人、豬HEV一樣具有遺傳學(xué)的異基因性。目前雖然還沒有證據(jù)表明禽HEV可以感染人類，非人靈長類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染禽HEV也未成功，但抗禽HEV抗體在人和豬血清中的檢出，盡管這些抗體不能確定是特異性抗禽HEV的抗體，禽HEV感染人類的可能性仍然不能排除。 為了調(diào)查禽HEV在人群中的血清學(xué)狀況，我們采用禽HEV ORF2 C端編碼的ORF2重組蛋白以及肽抗原用間接ELISA及Western Blot法對(duì)7

5、234份青年人血清進(jìn)行抗禽HEV ORF2抗體檢測和鑒定，結(jié)果從7234份人血清中檢出66份(陽性率0.91％)抗禽HEV ORF2抗體ELISA陽性血清；通過Western blot驗(yàn)證為特異性抗禽HEV ORF2抗體，其中28份血清(陽性率42.4％)含有特異性抗禽HEV肽抗原Pep-8或Pep-9抗體，其中女性21人，男性7人，HBsAg陽性3人。說明青年人群血清中存在特異性抗禽HEV抗體，陽性率為0.387％，女性抗禽HEV O

6、RF2抗體陽性率為男性的3倍，說明青年女性比青年男性更有可能感染禽HEV。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)對(duì)豬和禽血清中的抗禽戊型肝炎病毒ORF2抗體的檢測以及對(duì)陽性血清抗體特異性的鑒定。結(jié)果表明，人、豬和禽血清中抗禽HEV ORF2抗體陽性率為0.91％～62.5％。因?yàn)榍菖c哺乳動(dòng)物HEV ORF2抗原具有共有的抗原表位，而陽性血清中抗禽HEV ORF2特異性抗原表位抗體的陽性率為41.3％～92.1％，提示人、豬和雞都有感染禽HEV的可能性，這為進(jìn)一步驗(yàn)