2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:獲得日本血吸蟲Nanos樣蛋白基因的cDNA序列,克隆、表達(dá)和純化原核蛋白并初步鑒定。
  方法:應(yīng)用PCR技術(shù),擴(kuò)增獲得日本血吸蟲 Nanos樣基因的完整開放閱讀框(Open reading frame,ORF)。然后,將該基因亞克隆到原核表達(dá)載體pET28a(+),誘導(dǎo)表達(dá)并純化融合蛋白。用純化后的蛋白免疫家兔,制備該蛋白的多克隆抗體,分別用ELISA和Western blot對表達(dá)蛋白進(jìn)行初步鑒定。
  結(jié)果:同

2、源性分析表明,該基因?yàn)槿毡狙x的一個新基因,其編碼序列的開放閱讀框(ORF)為672bp,編碼223個氨基酸,理論相對分子量為25ku,PI為7.785。半定量RT-PCR技術(shù)分析顯示該基因在日本血吸蟲的蟲卵、尾蚴、童蟲、雄性成蟲和雌性成蟲的蟲體均有表達(dá),但在童蟲、蟲卵和雄蟲的表達(dá)量明顯高于其他階段的量,并且雄蟲的表達(dá)量明顯高于雌蟲。成功構(gòu)建了該基因的重組表達(dá)質(zhì)粒pET28a(+)-SjNanos,并在大腸埃希菌中獲得表達(dá),Weste

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