2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、油茶(Camellia oleifera)是我國南方重要的木本油料樹種,茶油中富含油酸、亞油酸等不飽和脂肪酸,為優(yōu)質(zhì)食用油。但油茶種子含油率低,直接影響油茶的發(fā)展和經(jīng)濟效益的發(fā)揮。三酰甘油(TAG)是油茶最主要的儲存脂類,而二酰甘油?;D(zhuǎn)移酶(DGAT)是TAG合成的Kennedy途徑中唯一的限速酶,其主要作用是催化二酰甘油加上?;舅嵝纬扇8视?,可見DGAT酶對TAG的累積起著直接作用。因此開展油茶DGAT基因的克隆和功能分析,對

2、揭示油茶油脂合成的分子機制有重要意義。本論文主要研究結(jié)果如下:
   (1)油茶DGAT1基因的分離鑒定。在GeneBank中以DGAT為關(guān)鍵詞進行搜索,選出5條產(chǎn)油植物DGAT1的氨基酸序列和全長cDNA序列,通過比對分析,在保守區(qū)設(shè)計了一對簡并引物。以國家審定油茶優(yōu)良品種--‘華碩’的近成熟種子胚乳為材料提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA,通過RT-PCR擴增出了一條大小約500bp的條帶,測序得到506bp的部分cDNA序列

3、。并在網(wǎng)上進行BLAST比對分析,確認所得片段為油茶DGAT1部分基因片段。
   (2)油茶DGAT1基因的全長cDNA克隆及生物信息學分析。根據(jù)油茶DGAT1基因的部分cDNA序列信息,設(shè)計了3條油茶DGAT1基因5’RACE特異引物和兩條3’RACE用的特異引物。以‘華碩’的近成熟胚乳為材料提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄制備RACE ready cDNA,進行5’RACE和3’RACE擴增。拼接的序列在NCBI中BLAST確認為油茶

4、DGAT1基因的全長cDNA序列,該基因命名為co-dgatl。通過Vector NTI9.0等生物軟件的分析,此cDNA序列長1893bp,包含1個1548bp完整的CDS及121bp5’UTR和229bp3’UTR,編碼515個氨基酸。應(yīng)用一系列生物信息學進行預(yù)測分析,結(jié)果顯示:其蛋白分子量為58.44 k Da,理論等電點為8.70,其中正電荷氨基酸殘基數(shù)目為46,負電荷氨基酸殘基數(shù)目為38;CODGAT1蛋白質(zhì)不穩(wěn)定系數(shù)為46.

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