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1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文白菜型油菜EPSPs全長cDNA的克隆和原核表達(dá)姓名：游大慧申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：李旭鋒20040501符合傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分類的結(jié)論。將其推導(dǎo)蛋白質(zhì)序列與上述8種植物的氨基酸做同源性比對，發(fā)現(xiàn)它與歐洲油菜和諸葛菜EPSPs的同源性都為95%，與擬南芥的為92，與西紅柿74，與煙草73，與華九頭獅子草和矮牽牛的為72，與水稻的同源性最低，為71%a設(shè)計(jì)一對引物:5CGGAATTCATGGCGCAAGCT
2、AGCAGAATC3，和5，一TTAGTGCTTTGTGATACTTTCAAGGAC3，用PCR方法將白菜型油菜EPSPs的編碼區(qū)擴(kuò)增出來后插入到改造自Pharmacia公司的pGEX2T的表達(dá)載體GTK中，在大腸桿菌DH5。中用工PTG誘導(dǎo)成功地表達(dá)了EPSPs和谷膚營膚S一轉(zhuǎn)移酶(GST)的融合蛋白質(zhì)EPSPsGST。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用0.1mMIPTG誘導(dǎo)的效果優(yōu)于0.3mM0.5mM1mM的IPTG的效果:37℃的培養(yǎng)溫度比30℃的培
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