2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以品系12,冀豆12和豫豆22三個(gè)大豆品種為材料,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法對大豆子葉節(jié)進(jìn)行轉(zhuǎn)化,設(shè)計(jì)了不同品種、不同共培養(yǎng)光照條件和不同共培養(yǎng)時(shí)間的正交試驗(yàn)將植酸酶基因phyA基因轉(zhuǎn)入大豆基因組內(nèi),并得到了一批抗性植株。利用轉(zhuǎn)基因高代植株吉林35對轉(zhuǎn)基因大豆進(jìn)行功能鑒定。
   (1)大豆遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化:在本研究范圍內(nèi)大豆品種冀豆12子葉節(jié)在侵染以后,接種到pH5.4的共培養(yǎng)基上,在24℃,10 h光照的條件下共培養(yǎng)10d,誘

2、導(dǎo)篩選,獲得較高的抗性芽出芽率。
   (2)提取T6代轉(zhuǎn)基因植株mRNA,根據(jù)phyA基因設(shè)計(jì)引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,對cDNA序列測定,測定的序列與GenBank中的序列進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果表明其與目標(biāo)phyA基因(GenBank注冊號(hào)為:AF537344.1)同源性達(dá)到99%,說明目的基因在轉(zhuǎn)基因大豆植株中穩(wěn)定遺傳和表達(dá)。
   (3)本試驗(yàn)以轉(zhuǎn)植酸酶基因大豆高代植株不同株系為供試材料,利用營養(yǎng)液液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)基無

3、菌培養(yǎng)的方法,測定了不同轉(zhuǎn)化株系根系分泌植酸酶的能力和不同磷處理?xiàng)l件下對磷的吸收利用能力。結(jié)果表明,植酸鈉處理下,高代轉(zhuǎn)化株系根系分泌植酸酶能力高于對照植株,營養(yǎng)液培養(yǎng)條件下T6-12、T6-44、T6-66與對照差異顯著,超對照2.9-3.5倍;而在固體培養(yǎng)基無菌培養(yǎng)條件下T6-3、T6-12和T6-44與對照差異顯著,提高2.4-2.8倍。植酸磷處理下,轉(zhuǎn)化株系磷含量比對照株系高1.11-3.18倍,T6-12、T6-44分別是對照

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