綠竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析.pdf

1、SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1)/AGL20(AGAMOS-LIKE20)是MADS-box家族一員，在植物開(kāi)花過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用，它能夠整合來(lái)自光周期途徑、春化途徑、自主開(kāi)花途徑和赤霉素途徑中的信號(hào)，并與其它基因相互作用共同調(diào)節(jié)植物的開(kāi)花時(shí)間以及花的類(lèi)型和花分生組織。竹類(lèi)植物開(kāi)花時(shí)間具有不確定性，營(yíng)養(yǎng)周期長(zhǎng)，因此SOC1勺克隆對(duì)竹類(lèi)植物的成花機(jī)理研究具有重要意義。本課題根據(jù)水稻、

2、小麥、玉米、高粱以及雷竹反轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)計(jì)引物，采用RACE方法分別得到BoSOC1 cDNA全長(zhǎng)1049bp和PvSOC1cDNA全長(zhǎng)1025bp。高保真酶擴(kuò)增綠竹SOC1ORF區(qū)得到BoSOC15種片段，分別命名為BoSOC11-3，BoSOC11-5，BoSOC1 Q-2，BoSOC1 Q-8，BoSOC12-5。其中BoSOC11-3開(kāi)放閱讀框?yàn)?66bp，編碼221個(gè)氨基酸;BoSOC11-5開(kāi)放閱讀框?yàn)?69bp，編碼222

3、個(gè)氨基酸;BoSOC1 Q-2開(kāi)放閱讀框?yàn)?72bp，編碼223個(gè)氨基酸;BoSOC1 Q-8開(kāi)放閱讀框?yàn)?69bp，編碼222個(gè)氨基酸;BoSOC12-5開(kāi)放閱讀框?yàn)?75bp，編碼224個(gè)氨基酸。高保真酶擴(kuò)增雷竹SOC1ORF區(qū)，得到1條PvSOC1序列，PvSOC1開(kāi)放閱讀框?yàn)?81bp，編碼226個(gè)氨基酸。
　　 通過(guò)序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)BoSOC1和PvSOC1基因在植物中相當(dāng)保守，并且與禾本科植物可聚為一類(lèi)。Real-Tim

4、e PCR結(jié)果表明BoSOC1在花芽中的表達(dá)量是營(yíng)養(yǎng)芽中的12倍，而PvSOC1在開(kāi)花雷竹地上部位中成熟葉中的表達(dá)量最高，在葉芽中的表達(dá)量最低;PvSOC1在不開(kāi)花雷竹地上部位中葉芽中的表達(dá)量最高，在莖中的表達(dá)量最低。PvSOC1轉(zhuǎn)擬南芥功能驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)35S::PvSOC1擬南芥蓮座葉數(shù)量明顯少于野生型擬南芥，并且該轉(zhuǎn)基因株比野生株早開(kāi)花6-7天，具有明顯的早花表型。轉(zhuǎn)基因株還表現(xiàn)出花型較小，一片花瓣在開(kāi)花早期被花萼包裹，不能順利展開(kāi)，表