柑橘碎葉病毒外殼蛋白和運(yùn)動(dòng)蛋白在本氏煙中亞細(xì)胞定位研究.pdf

1、由柑橘碎葉病毒(Citrus tatter leaf virus，CTLV)是危害柑橘的重要病原，侵染柑橘后引起葉片畸形等癥狀，該病毒在我國(guó)乃至世界范圍內(nèi)發(fā)生普遍，給農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)帶來重大損失。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究主要集中在CTLV的基因組表達(dá)策略以及CTLV的分子生物學(xué)特性方面，而對(duì)于CTLV侵染循環(huán)史以及致病分子機(jī)理卻不清楚。外殼蛋白(CP)和運(yùn)動(dòng)蛋白(MP)作為病毒重要的結(jié)構(gòu)蛋白在病毒的侵染循環(huán)史以及致病機(jī)理往往起著重要的作用。本研究

2、利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)瞬時(shí)表達(dá)方法對(duì)CTLV CP和MP在本氏煙（N.benthamiana）中的亞細(xì)胞定位進(jìn)行研究，為進(jìn)一步揭示CTLV CP和MP的功能奠定基礎(chǔ)。本研究取得主要結(jié)果如下:
　　1.以CTLV-STO（GenBank登錄號(hào)為JQ765412）侵染性克隆質(zhì)粒為模板，PCR擴(kuò)增獲得CTLV CP和MP基因。采用gateway技術(shù)分別構(gòu)建至植物表達(dá)載體pMW390（帶YFP標(biāo)簽）和pMDC45（帶GFP標(biāo)簽），熱擊轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌G