細(xì)胞核肌動蛋白與p53蛋白相互作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、肌動蛋白普遍存在于各類細(xì)胞的細(xì)胞核中。近來研究表明，核內(nèi)肌動蛋白不僅參與了染色質(zhì)改構(gòu)、mRNA加工和運(yùn)輸?shù)仍S多重要的生理活動，還參與了RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ所介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄過程。本實(shí)驗(yàn)室前期的一些工作表明，核內(nèi)肌動蛋白可以下調(diào)p53介導(dǎo)的p21基因轉(zhuǎn)錄，并且核內(nèi)肌動蛋白與p53存在共沉淀現(xiàn)象。為了進(jìn)一步研究肌動蛋白與p53相互作用的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽(GST-tag)的肌動蛋白及其突變體，利用GST-pull do

2、wn實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肌動蛋白N端的第1-18個氨基酸和C端第338-375氨基酸在肌動蛋白與p53相互作用過程中起到了重要的作用。隨后利用GST-p53及其突變體進(jìn)行了GST-pull down實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)p53 N端第1-44氨基酸為肌動蛋白與p53相互作用所必需。最后利用六聚組氨酸標(biāo)簽(His-tag)的肌動蛋白及其突變體與GST-p53進(jìn)行GST-pull down實(shí)驗(yàn)，證明肌動蛋白與p53之間的作用是直接的。本研究結(jié)果為進(jìn)一步探討核內(nèi)肌動

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