硼毒下柑橘根葉蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、硼（B）是植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中所必需的微量營養(yǎng)元素之一，與植物的核酸代謝、碳水化合物合成和運(yùn)輸、細(xì)胞壁合成、生物膜的完整性和功能等有關(guān)。作物硼毒害雖不如缺硼普遍，但硼對(duì)植物的適用量和致害量之間的差距很小，世界上有不少地區(qū)存在因施肥不當(dāng)或其它原因而導(dǎo)致作物硼毒害現(xiàn)象。柑橘為亞熱帶常綠果樹，我國柑橘主產(chǎn)區(qū)時(shí)常出現(xiàn)不同程度的硼中毒現(xiàn)象。本研究以耐硼毒性不同的雪柑和酸柚為試驗(yàn)材料，采用雙向電泳技術(shù)研究了硼毒下柑橘根葉蛋白質(zhì)組的變化，旨在從蛋白質(zhì)組

2、學(xué)水平揭示柑橘耐硼毒的分子機(jī)制，為柑橘高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、通過對(duì)蛋白樣品的制備方法、蛋白上樣量、凝膠染色方法等參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，建立了適用于柑橘蛋白質(zhì)組研究的雙向電泳技術(shù)體系，經(jīng)膠體考染法染色后可獲得背景清晰、重復(fù)性好、蛋白點(diǎn)分辨率較高的雙向電泳圖譜，經(jīng)PDQuest軟件檢測(cè)有800多個(gè)蛋白點(diǎn)。
　　2．運(yùn)用2-DE技術(shù)對(duì)10μM（對(duì)照）和400μM（硼毒）硼處理的酸柚和雪柑實(shí)生苗根葉蛋白質(zhì)進(jìn)

3、行了分離，并利用 PDQuest凝膠圖像分析軟件確定了224個(gè)硼毒害誘導(dǎo)的差異表達(dá)蛋白，其中138個(gè)上調(diào)，81個(gè)下調(diào)。
　　3.對(duì)224個(gè)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS），成功鑒定了206個(gè)蛋白點(diǎn)，這些差異蛋白主要涉及（1）抗氧化與解毒代謝、（2）逆境脅迫蛋白、（3）細(xì)胞壁與骨架代謝、（4）碳水化合物及能量代謝、（5）蛋白質(zhì)代謝、（6）核酸代謝、（7）細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)、（8）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、（9）脂質(zhì)代謝和（10）功能

4、未知蛋白。
　　4.在根尖，酸柚和雪柑在硼毒脅迫時(shí)都能誘導(dǎo)相關(guān)抗氧化酶上調(diào)表達(dá)以抵御硼毒害造成的氧化脅迫；此外，相關(guān)抗性蛋白（如熱激蛋白、鋅指蛋白及拉鏈蛋白）、蛋白酶體和膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白V-ATPase的上調(diào)，以及延伸因子和翻譯起始因子的差異表達(dá)等可能都有利于柑橘根的耐硼毒性；不過，硼毒對(duì)酸柚和雪柑根中參與蛋白、核酸等代謝的相關(guān)蛋白的影響并不相同。
　　5．雪柑葉片的耐硼毒性明顯比酸柚高，可能與硼毒下雪柑葉片核酮糖1,5-二磷酸羧