傳染性法氏囊病病毒全基因組克隆及反向遺傳系統(tǒng)的建立.pdf

1、建立動物RNA病毒的反向遺傳系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)病毒的遺傳拯救,從而可以在DNA水平上對RNA病毒進(jìn)行遺傳操作,為深入研究RNA病毒的分子生物學(xué)及病毒與宿主的相互作用提供了強(qiáng)有力的技術(shù)工具.對RNA病毒進(jìn)行遺傳拯救或構(gòu)建感染性克隆已成為分子病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒結(jié)構(gòu)與功能深入研究的必經(jīng)之路.而在國內(nèi)開展這方面的研究,特別是動物RNA病毒不多.雞傳染性法氏囊病(IBD)是危害世界養(yǎng)禽業(yè)的嚴(yán)重傳染性之一,該研究工作以該病的病原傳染性法氏囊病病毒(IBDV

2、)為模型,在克隆IBDV浙江分離株全基因組cDNA的基礎(chǔ)上,在國內(nèi)首次嘗試構(gòu)建IBDV反向遺傳系統(tǒng),拯救經(jīng)過分子標(biāo)記的IBDV,并初步進(jìn)行IBDV功能學(xué)研究.該研究工作首次在國內(nèi)獲得IBDV全基因組序列(HZ2株、JD1株),并且這是用長距離RT-PCR方法取得的,在國際上僅晚于荷蘭學(xué)者Boot等人在2000年建立的類似方案;在A、B節(jié)段所引入的遺傳標(biāo)記沒有出現(xiàn)在目前已報(bào)道的自然界存在的野生IBDV序列上,因此,可以認(rèn)為該方案能適用于對