29327.青島文昌魚gphr基因的表達(dá)、鑒定及定位

1、山東理工大學(xué)山東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文青島文昌魚青島文昌魚GpHRGpHR基因的表達(dá)、鑒定及定位基因的表達(dá)、鑒定及定位ExpressionExpressionExpressionExpressionidentificationidentificationidentificationidentificationlocationlocationlocationlocationofofofofGpHRGpHRGpHRGpHRGeneGeneGe

2、neGenefromfromfromfromAmphioxusAmphioxusAmphioxusAmphioxusBranchiostomaBranchiostomaBranchiostomaBranchiostomabelcheribelcheribelcheribelcheritsingtauensetsingtauensetsingtauensetsingtauense研究生：董娟董娟董娟董娟指導(dǎo)教師：趙博生（教授）趙博生（教授

3、）趙博生（教授）趙博生（教授）協(xié)助指導(dǎo)教師：申請學(xué)位門類級別：理理理理學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)碩碩碩碩士士士士學(xué)科專業(yè)名稱：生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向：分子細(xì)胞生物學(xué)分子細(xì)胞生物學(xué)分子細(xì)胞生物學(xué)分子細(xì)胞生物學(xué)論文完成日期：2010201020102010年年年年4444月月月月15151515日日日日分類號：Q75Q75Q75Q75密級：單位代碼：10433104331043310433學(xué)號

4、：Y0710164Y0710164Y0710164Y0710164山東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要I摘要糖蛋白激素受體(glycoproteinhmonereceptsGpHRs)屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族(GPCRs)的亞家族。在哺乳動物中，GpHRs主要參與兩個(gè)主要的內(nèi)分泌途徑：下丘腦垂體性腺(HPG)和下丘腦垂體甲狀腺(HPT)調(diào)控軸，主要調(diào)控性腺和甲狀腺的發(fā)育和功能。文昌魚屬于脊索動物門頭索亞門，處在無脊椎動物向脊椎動物進(jìn)化的關(guān)鍵位置，

5、是研究脊索動物演化和胚胎發(fā)育的模式動物。利用分子生物學(xué)方法研究文昌魚的GpHR基因，可以在分子層面上闡釋脊椎動物GpHR基因的起源與進(jìn)化。有助于了解該基因的原始功能以及脊椎動物同源基因的起源與進(jìn)化。本文對文昌魚GpHR基因的進(jìn)化、表達(dá)及定位方面進(jìn)行了研究。本實(shí)驗(yàn)室利用RTPCR和RACE技術(shù)已得到了文昌魚GpHR基因的cDNA序列。它的最大開放閱讀框?yàn)?377bp，編碼一個(gè)由459個(gè)氨基酸組成的多肽鏈，其分子量大約為50kDa。在所構(gòu)建

6、的進(jìn)化樹中，文昌魚的糖蛋白激素受體處于基部，說明文昌魚GpHR還處于比較原始的狀態(tài)，可能是GpHR進(jìn)化的一個(gè)前體；構(gòu)建原核和真核表達(dá)載體，表達(dá)文昌魚GpHR蛋白，獲得了分子量約為50kDa的蛋白；分別使用兔抗TSHR、FSHR、LHRCGR的抗體進(jìn)行Westernblot檢測，結(jié)果表明該融合蛋白與三種抗體均有陽性反應(yīng)，說明該編碼蛋白可能是一類糖蛋白激素受體；免疫組織化學(xué)分析，兔抗TSHR抗體的免疫反應(yīng)主要在內(nèi)柱，卵巢，精巢組織中。另外，