中國青島文昌魚TRAF家族基因的發(fā)現(xiàn)及研究.pdf

1、腫瘤壞死因子受體相關因子(TRAF)是一個比較保守的胞內銜接蛋白家族。TRAF家族成員都有相似的結構，它們的C端都有一個保守的結構域，命名為TRAF結構域，除TRAF1外，它們的N端都具有一個環(huán)指結構和若干個鋅指結構。TRAFs是胞內重要的信號傳導分子，它們可以與TNFR和IL-1R/TLR家族受體發(fā)生直接或間接的相互作用，以調節(jié)NF—кB和JNK信號通路的活性。在這個過程中，TRAFs可以參與調節(jié)動物體內多種生物功能，如胚胎發(fā)育過程、

2、天然免疫及適應性免疫反應等。 在中國青島文昌魚中，我們克隆得到了四個TRAF家族成員，分別命名為BbtTRAF2、3、4、6。系統(tǒng)發(fā)生分析顯示，我們克隆得到的四個BbtTRAFs與它們在脊椎動物中相應的TRAF2、3、4、6基因是直系同源的基因。Southern雜交及基因組結構比較分析顯示文昌魚TRAF家族呈現(xiàn)一種多拷貝及結構多態(tài)性的狀態(tài)，說明文昌魚中的TRAF家族正處于一個變化活躍的時期。通過Real-time PCR及原位雜

3、交的方法發(fā)現(xiàn)，BbtTRAF2、3、4、6在文昌魚胚胎發(fā)育時期表現(xiàn)出各自不同的表達模式，但在成體文昌魚中，它們的表達都集中在文昌魚消化道中。另外，在LPS感染刺激后，BbtTRAF3的表達量在刺激后8小時時上升到50倍，BbtTRAF2、6在刺激后表達量增加的幅度不是很大，而BbtTRAF4的表達量則基本沒有變化。最后，在NF—KB報告基因熒光素酶檢測中發(fā)現(xiàn)BbtTRAF6在HEK293T細胞中可以激活NF—KB，BbtTRAF4只有較

4、弱的激活作用，而BbtTRAF2、3則沒有影響NF—KB的作用。 總結以上所有結果，TRAF家族在進化過程中是非常保守的。文昌魚中的TRAF家族正處于無脊椎動物向脊椎動物進化的過渡階段，這一時期表現(xiàn)出的多拷貝及多態(tài)性對該家族在以后的進化中成員及功能的增加是非常重要的。文昌魚中的TRAF家族可能與它們在其它物種中的同源基因一樣，具有多種多樣的生物功能，但是它們有著自己獨特的作用過程，例如不同的信號通路，不同的相互作用分子等。我們對