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1、大連水產(chǎn)學(xué)院碩士學(xué)位論文抗軟海綿酸單抗克隆抗體的制備及初步應(yīng)用姓名：陳冰君申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：梁玉波20050501AbstractMyresearchaimedtopreparemonoclonalantibody(McAb)againstokadaicacid(OA)，whichWaSanimportantcomponentofdiarrheticshellfishpoison(DSP)，anddevelopa
2、nimmunoassayofOAfortheacutediagnosisintheaquaticproductandseawaterAnindirectcompetitiveELISAwasfoundedonthebaseofmonoclonalantibodyThehaptenofOAWasconjugatedtobovineserumalbumin(BSA)andovalbumin(OVA)accordingtoEDCmethodO
3、AOVAWaSthedetectionagenandOABSAWaStheimmunogentoinjectBALB／CmiceThecouplingratioofOAtOBSAwas27：1andtoOVAWaS12：1，BALB／cmicewereinjectedbytheimmunogenandthetitcrofantiserumwaSexceeded1：100000bythetestoftwo—dimensionaltitra
4、tionmethod，Spleniecellsofmiceimmunizedbv0ABSAproduceantibodiesagainstOATheeellfusionwascarriedoutbymixingspleniccellswitllthemyelomacellsusingpolyethyleneglycol(PEG)Afterthecellfusion，hybridomaceilswerescreenedinaHATmedi
5、umHybridomacellsstrainssecretingmonoclonalantibodiesangaistOAwereselectedoutbyusingindirectenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)，thebestdilutionofcoatingantigenandtheoptionalworkingdilutionoftheenzymeconjugmewereallat1：1
6、000AftercloningbylimiteddilutionfourhybridomaeellclonesStablyproducedanti0AmonoclonalantibodywereobtainedTheantiOAmonoclonalantibodywasproducedbythewayofthemouseascitesmethodandthetiterofaSCjteswereexceeded】：30000Thedete
7、ctionofOAconcentrationbycompetitiveELISAwassuccessfullyestablishedThebestdilutionofcoatingantigenwas1：800andtheoptionalworkingdilutionoftheenzymeconjugatewereallatl：1000。Undertheexcellentcondition，thedetectionrangeofOAwa
8、s312～150ng／ml，theaverageinterassaycoefficientsofvariationinthemeaSurementsamplesofOAwas81％Thcrecoveryrangwasfrom872％to1123％TheMcAbagainstOAwerepreparedsuccessfullyandacompetitiveELISAmethodfordetectingOAhasbeenestablishe
9、dTheSuccessfulpreparationofmonoclonalantibodiesagainstOAwasafirmsubstantialfoundationfordevelopinganELISAmethodthatmaydetermineOAasquicklyandeconomicallyaspossibleandfurnishaexperiencefordetectedothershellfishtoxinsjnChi
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