2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩58頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是由多個(gè)可被Ca2+激活的絲氨酸蛋白激酶和蘇氨酸蛋白激酶所組成超家族,存在于細(xì)胞漿內(nèi),是重要的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。PKC存在于包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的多種組織中,在神經(jīng)元興奮性的調(diào)節(jié)、細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、突觸可塑性等過程中發(fā)揮重要作用。在靜息情況下,PKC以無活性的形式存在于細(xì)胞漿中,當(dāng)有外界刺激存在時(shí),PKC被激活移位(Translocation)于細(xì)胞膜上即膜轉(zhuǎn)位

2、,進(jìn)而發(fā)揮重要的生理功能。
   以往的研究證實(shí),甲醛炎性痛可誘導(dǎo)大鼠脊髓神經(jīng)元內(nèi)PKC活化;我室的研究還證實(shí),甲醛炎性痛可誘導(dǎo)大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡。有關(guān)PKC激活在脊髓傷害性信息傳遞及痛覺過敏方面的作用已有一些報(bào)道,但PKC是否參與甲醛炎性痛誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡過程尚未見相關(guān)報(bào)道。
   Bax蛋白是調(diào)控細(xì)胞凋亡的相關(guān)蛋白之一,能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡過程。Bax蛋白存在于細(xì)胞漿中,廣泛分布于機(jī)體各組織,無明顯的組織特異性。如果

3、甲醛炎性痛引起PKC活性改變參與傷害性信息傳入引起的脊髓神經(jīng)元凋亡過程,其是否通過影響B(tài)ax蛋白表達(dá)而影響神經(jīng)元凋亡尚有待進(jìn)一步研究加以證實(shí)。
   因此,本實(shí)驗(yàn)首先采用流式細(xì)胞技術(shù),觀察預(yù)先鞘內(nèi)注射PKC抑制劑燈盞花素乙(Chelerythrine chloride,CH)對甲醛炎性痛大鼠L4-5脊髓節(jié)段神經(jīng)元凋亡率的影響,并觀察了正常大鼠鞘內(nèi)給予PKC激動(dòng)劑佛波醇酯(Phorbol12-Myrstate-Acetate,PM

4、A)對脊髓神經(jīng)元凋亡率的影響,探討PKC在甲醛炎性痛誘導(dǎo)大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡中的作用。在此基礎(chǔ)上,采用免疫組織化學(xué)方法,觀察了甲醛炎性痛誘導(dǎo)大鼠脊髓后角神經(jīng)元內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)的改變,并通過鞘內(nèi)注射PKC激動(dòng)劑及抑制劑,觀察PKC對大鼠脊髓后角神經(jīng)元凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)的影響,探討PKC參與甲醛炎性痛誘導(dǎo)脊髓神經(jīng)元凋亡的機(jī)制。
   1.PKC對甲醛炎性痛大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡的影響
   25只健康雄性Sprague

5、-Dawley大鼠,體重280±20克,隨機(jī)分為5組,分別為正常對照組(control組),甲醛組(F組)、甲醛+鞘內(nèi)注射溶劑DMSO組(F+DMSO組),甲醛+鞘內(nèi)注射PKC抑制劑CH組(F+CH組),正常大鼠鞘內(nèi)注射PKC激動(dòng)劑佛波醇酯組(PMA組),每組5只動(dòng)物。Control組不做任何處理,直接斷頭取材。F組于大鼠右側(cè)足底注射甲醛后,3d時(shí)斷頭取材;F+DMSO組和F+CH組大鼠預(yù)先鞘內(nèi)注射10μlDMSO或CH溶液,15分鐘后

6、于右側(cè)足底注射甲醛,于甲醛注射后3d時(shí)取材。PMA組于正常大鼠鞘內(nèi)注射10μl PMA后,于鞘內(nèi)注射PMA后3d時(shí)取材。采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測脊髓神經(jīng)元的凋亡率。
   結(jié)果發(fā)現(xiàn),正常大鼠鞘內(nèi)注射PMA后,動(dòng)物出現(xiàn)煩躁不安,搔抓盒底、舔咬物品和自發(fā)退縮等傷害性感受行為,表明鞘內(nèi)注射PMA可誘導(dǎo)正常大鼠產(chǎn)生自發(fā)痛反應(yīng)。
   流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),control組大鼠L4-5脊髓神經(jīng)元凋亡率很低。與control組相比,

7、F組大鼠L4-5脊髓神經(jīng)元凋亡率明顯增高(P<0.01);與F組相比,F(xiàn)+DMSO組脊髓神經(jīng)元凋亡率無顯著性差異,表明鞘內(nèi)注射溶劑DMSO對脊髓神經(jīng)元凋亡率無明顯影響。與F組相比,F(xiàn)+CH組大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡率明顯降低(P<0.01)。與control組相比,PMA組大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡率則表現(xiàn)為明顯升高(P<0.01)。
   以上結(jié)果表明,PKC可以促進(jìn)脊髓神經(jīng)元凋亡,在甲醛炎性痛誘導(dǎo)的大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡過程中,PKC起促進(jìn)神

8、經(jīng)元凋亡的作用。
   2.甲醛炎性痛誘導(dǎo)大鼠脊髓后角神經(jīng)元凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)改變及其PKC對Bax蛋白表達(dá)的影響
   2.1甲醛炎性痛誘導(dǎo)脊髓后角神經(jīng)元凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)改變
   25只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,體重280±20克,隨機(jī)分為5組,分別為正常對照組(control組)、甲醛12h組(F12h組)、甲醛1d組(F1d組)、甲醛2d組(F2d組)、甲醛3d組(F3d組),每

9、組5只動(dòng)物。Control組不做任何處理,直接斷頭取材。甲醛各組動(dòng)物均于足底注射甲醛后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)斷頭取L4-5脊髓節(jié)段,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察L4-5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層神經(jīng)元Bax蛋白的表達(dá)。
   結(jié)果發(fā)現(xiàn),大鼠右后足底注射甲醛后,立即出現(xiàn)舔、搖、和自發(fā)性縮足等自發(fā)痛行為,且注射部位出現(xiàn)紅、腫等明顯的炎癥反應(yīng),表明動(dòng)物出現(xiàn)了炎性痛。
   免疫組化檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),control組大鼠L4-5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax免疫

10、反應(yīng)陽性細(xì)胞面積較小,細(xì)胞染色較淺。與control組相比,足底注射甲醛后12h,大鼠兩側(cè)脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積有所增大(P<0.01),但陽性細(xì)胞平均光密度值增加不明顯(P>0.05),表明Bax表達(dá)已有所增加;足底注射甲醛1d時(shí),大鼠脊髓后角Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積進(jìn)一步增大(P<0.01),達(dá)到峰值,免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞平均光密度值也明顯增加(P<0.01),表明細(xì)胞染色也明顯加深;與F1d組比較,F(xiàn)2d組大鼠

11、脊髓后角Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積以及陽性細(xì)胞染色深度均開始下降,但均高于control組水平(P<0.01);F3d組大鼠Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積仍高于control組水平(P<0.01),但陽性細(xì)胞平均光密度值已接近正常對照組水平(P>0.05)。同組動(dòng)物左右兩側(cè)脊髓后角相比,Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積以及陽性細(xì)胞染色深度均無明顯差異。
   以上結(jié)果表明,甲醛炎性痛可誘導(dǎo)兩側(cè)脊髓后角神經(jīng)元Bax蛋白表達(dá)增加,于注射甲醛后

12、1d時(shí)達(dá)到高峰。
   2.2 PKC對甲醛炎性痛誘導(dǎo)的大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡相關(guān)蛋白Bax的影響
   25只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,體重280±20克,隨機(jī)分為5組,分別為正常對照組(control組)、甲醛組(F組)、甲醛+鞘內(nèi)注射溶劑DMSO組(F+DMSO組),甲醛+鞘內(nèi)注射PKC抑制劑CH組(F+CH組),正常大鼠鞘內(nèi)注射PKC激動(dòng)劑佛波醇酯組(PMA組),每組5只動(dòng)物。Control組不做任何

13、處理,直接斷頭取材。F組于大鼠右側(cè)足底注射甲醛后1d時(shí)斷頭取材;F+DMSO組和F+CH組大鼠預(yù)先鞘內(nèi)注射10μlDMSO或CH溶液,15分鐘后于右側(cè)足底注射甲醛,于注射甲醛后1d取材。PMA組于正常大鼠鞘內(nèi)注射10μlPMA后,于鞘內(nèi)注射PMA后1d取材。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察大鼠L4-5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax蛋白的表達(dá)改變。
   結(jié)果發(fā)現(xiàn):與control組比較,F(xiàn)組大鼠L4-5節(jié)段脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax蛋白表達(dá)明顯

14、增加,表現(xiàn)為Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積增大(P<0.01),免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞染色加深,平均光密度值升高(P<0.01)。與F組比較,F(xiàn)+DMSO組大鼠脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積及平均光密度值均無顯著性差異(P>0.05),表明鞘內(nèi)注射溶劑DMSO對炎性痛大鼠脊髓后角Bax蛋白表達(dá)無明顯影響。與F組比較,F(xiàn)+CH組大鼠脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積明顯減少,陽性細(xì)胞染色明顯變淺(P<0.01)。與contr

15、ol組相比,PMA組大鼠脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板層Bax免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積以及平均光密度值均明顯增加(P<0.01)。
   以上結(jié)果表明,鞘內(nèi)注射PKC的抑制劑CH可抑制傷害性信息傳入誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元Bax蛋白的表達(dá);鞘內(nèi)注射PKC的激動(dòng)劑PMA可促進(jìn)脊髓神經(jīng)元Bax蛋白的表達(dá)。
   結(jié)論:
   1.本研究結(jié)果證實(shí),PKC抑制劑可抑制甲醛炎性痛誘導(dǎo)的大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡過程,PKC激活可促進(jìn)正常大鼠脊髓神經(jīng)元凋亡。

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論