水通道蛋白1在重癥急性胰腺炎時肺組織的表達(dá)及清胰湯干預(yù)的實驗研究.pdf

1、背景：重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP) 發(fā)病兇險，并發(fā)癥多，死亡率高，其發(fā)病機(jī)制未完全明了，可引起胰腺局部和全身炎癥反應(yīng)。?？衫奂耙认偻馄鞴?，如肺臟、腎臟、等。研究表明，75﹪的重癥急性胰腺炎病死患者與急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)有關(guān)<'[1]>。而ARDS是急性肺損傷的一個終末結(jié)局<'[2]>，也是重癥急性胰腺炎病人早期死亡的主要原因。早期減輕肺損傷對于降低SAP的死亡率有重要意義。水通道

2、蛋白(Aquaporin)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種蛋白，分布于肺中的主要有1、4、5。它們主要分布在肺血管和肺泡上皮<'[3，4]>。它們在肺水液體代謝中起重要作用。 目的：本試驗觀察水通道蛋白1(Aquaporinl，AQP1)在SAP肺損傷大鼠肺組織中的表達(dá)，從新的角度探討肺損傷發(fā)生的機(jī)制。并觀察清胰湯對SAP大鼠肺臟AQP1表達(dá)的影響。 方法：健康Wistar大鼠120只，體重220-280克，雌雄不拘，隨機(jī)分為4組(S

3、AP組、假手術(shù)組、地塞米松治療組、清胰湯治療組)，每組30只。SAP組和藥物干預(yù)組開腹后用無損傷動脈夾夾閉胰膽管入肝門處，逆行胰膽管緩慢注入1.5﹪的熊去氧膽酸鈉溶液(1ml/kg)，取出動脈夾關(guān)腹，建立SAP肺損傷模型。清胰湯干預(yù)組造模后胃管注入中藥煎液(10ml/kg)。地塞米松干預(yù)組于造模后股靜脈注入地塞米松(1ml/kg)。假手術(shù)組常規(guī)剖腹后翻動胰腺，關(guān)腹。各組又分為6小時、12小時、24小時組，分別與造模后6小時、12小時、2

4、4小時處死，取肺組織及動靜脈血。檢測血清淀粉酶水平(AMY)、測定動脈血氣PO<,2>、PCO<,2>。取肺臟計算肺濕干重比值(W/D)、大體及鏡下觀察肺臟病理學(xué)改變，并用免疫組化和RT-PCR方法測定肺臟水通道蛋白1的表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)SAP各組與同時相點假手術(shù)組相比，血清AMY水平明顯升高(P<0.01)；動脈血PO<,2>明顯下降，PCO<,2>明顯升高(P<0.01)；腫W/D值增高明顯(P<0.01)；肺組織出現(xiàn)

5、水腫、充血、中性粒細(xì)胞浸潤、灶性肺不張等改變，并隨時限延長而加重。地塞米松組與同時相點SAP組相比，肺組織病理改變明顯減輕；血清AMY、動脈血PCO<,2>明顯下降(P<0.0 1)，PO<,2>明顯升高(P<0.01)。清胰湯組與同時相點SAP各組相比肺組織病理改變明顯減輕，血清AMY、動脈血PCO<,2>明顯下降(P<0.01)，動脈血PO<,2>明顯升高(P<0.01)。清胰湯組與同時相點地塞米松組相比，肺W/D值明顯降低(P<0

6、.05)，血清AMY水平明顯降低(P<0.05)，動脈血PO<,2>明顯升高，PCO<,2>明顯降低(P<0.05)。 (2)免疫組化結(jié)果：較之假手術(shù)組，SAP各時限組AQP1表達(dá)下降(P<0.01)24小時組AQPl表達(dá)有回升(P<0.01)；地塞米松干預(yù)組與SAP組相比，AQP l的表達(dá)量有顯著升高(P<0.01)；清胰湯組與SAP組相比AOP 1的表達(dá)量有顯著升高(P<0.01)；各時相點兩藥物干預(yù)組間AQP 1表達(dá)無顯著

7、差異(P>0.05)。 (3)RT-PCR結(jié)果：與假手術(shù)組相比SAP各時相組AQP1 mRNA 表達(dá)量下降(P<0.01)，24小時組AQP 1表達(dá)有回升(P<0.01)；地塞米松組與SAP組相比，AQP1 mRNA的表達(dá)量有顯著升高(P<0.01)；清胰湯組與SAP模型組相比AQP 1 mRNA的表達(dá)量有顯著升高(P<0.01)；兩藥物干預(yù)組各時相點之AQPl mRNA的表達(dá)無顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論：(1)應(yīng)

8、用1.5﹪熊去氧膽酸鈉逆行胰膽管內(nèi)注射，大鼠模型的肺臟組織經(jīng)病理學(xué)檢查，具有明確的肺臟水腫、充血、炎細(xì)胞浸潤、灶性肺不張等改變，肺濕干重比值明顯增加。說明該方法制備sAP合并肺損傷模型是成功的。 (2)SAP肺損傷時肺臟AQP 1表達(dá)降低，說明AQP1在肺臟的水液代謝中起重要作用。在SAP肺損傷中是一種保護(hù)性蛋白。 (3) 應(yīng)用清胰湯后AQP1的表達(dá)上升。說明清胰湯在治療SAP肺損傷時起到了通過某種途徑起到了調(diào)節(jié)了肺臟A