PPAR-γ及ANGPYL4在重病急性胰腺炎肺損傷發(fā)病機(jī)制中的作用及清胰湯干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過觀察過氧化物酶體增殖激活物受體(peroxisomeproliferator-activated receptor-γ，PPAR-γ)和血管生成素樣蛋白4(angiopoietin-likeprotein4，Angptl4)在重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)模型大鼠肺組織中的變化，探討PPAR-γ與Angptl4在重癥胰腺炎病情的發(fā)展過程中的作用及關(guān)系，從而進(jìn)一步探究重癥急性胰

2、腺炎時(shí)肺損傷的發(fā)病機(jī)理，同時(shí)觀察清胰湯的治療作用，為臨床上中西醫(yī)結(jié)合治療重癥急性胰腺炎提供進(jìn)一步的理論基礎(chǔ)。
　　方法:健康雄性SPF級(jí)SD大鼠56只，每組8只，隨機(jī)分為7個(gè)組:模型組(SAP組)，假手術(shù)組(SO組)，GW9662（PPAR-γ拮抗劑）干預(yù)組（GW組），羅格列酮（PPAR-γ激動(dòng)劑）干預(yù)組（ROSI/ROZ組），地塞米松治療（抗炎藥）組(DEX組)，清胰湯（中藥）治療組(QYT組)，清胰湯與地塞米松聯(lián)合組(Q+D)

3、。造模的方法:用1ml注射器經(jīng)十二指腸乳頭內(nèi)側(cè)胰膽管處逆行注入1.5％脫氧膽酸鈉（注射用量:1ml/kg）。SO組:打開腹腔后，僅滅菌手術(shù)器械輕輕的翻動(dòng)胰腺幾次。GW9662干預(yù)組(按劑量:5mg/kg，濃度:1mg/ml)、羅格列酮干預(yù)組(按劑量:5mg/kg，濃度:1mg/ml)、地塞米松組（按劑量:10mg/kg，濃度:5mg/ml）此三組造模后立刻注射治療藥物一次;地塞米松組在造模后6h和12h分別再次靜脈給藥，共給藥三次。清胰

4、湯組在造模之前0.5h，于胃管灌入中藥清胰湯，然后于造模后6h和12h再次灌入中藥，每次劑量:10ml/kg。聯(lián)合組中的地塞米松和清胰湯的給藥和處理方式同前，但兩者的劑量都減半，分別為:5mg/kg;5ml/kg。造模后24h剖殺大鼠，取肺組織及動(dòng)靜脈血。肺組織以及胰腺組織儲(chǔ)存于10％福爾馬林固定液中待用（病理切片）。應(yīng)用真空干燥法進(jìn)行大鼠肺組織濕/干比值的監(jiān)測(cè)，采集大鼠動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治鰷y(cè)定、大鼠血清淀粉酶含量的測(cè)定，ABC-雙抗體夾

5、心法測(cè)定大鼠血清中TNF-α的濃度，RT-PCR檢測(cè)檢測(cè)肺組織中PPAR-γ mRNA和Angptl4mRNA基因表達(dá)水平，采用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)肺組織中PPAR-γ和Angptl4蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:與假手術(shù)組相比較，SAP組大鼠的血清AMY、肺組織濕/干比值、血清TNF-α、肺組織中Angptl4 mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯增高，而動(dòng)脈血氧分壓和PPAR-γmRNA及蛋白表達(dá)水平均顯著降低，胰腺和肺組織病理結(jié)果顯示損傷

6、更加顯著，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有一定意義(P＜0.05)。與SAP組相比羅格列酮處理組的胰腺、肺組織病理損傷明顯減輕，肺組織Angptl4和PPAR-γ表達(dá)水平明顯上升;而GW9662處理組表現(xiàn)出不同程度的降低，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異(P＜0.05)。與SAP組比較，地塞米松組、清胰湯組、清胰湯聯(lián)合地塞米松組的血清AMY、肺組織濕/干比及TNF-α、肺組織中Angptl4 mRNA及蛋白表達(dá)水平都有不同程度的降低，而動(dòng)脈血氧分壓、PPAR-γ

7、mRNA及蛋白表達(dá)水平都有一定程度的上升，胰腺、肺組織病理結(jié)果顯示損傷程度有所減輕，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有一定意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:應(yīng)用1.5％的去氧膽酸鈉經(jīng)胰膽管內(nèi)逆行注射后，大鼠肺臟充血水腫，說明重癥急性胰腺炎大鼠模型的制備比較穩(wěn)定，胰腺、肺組織病理損傷較為明顯。發(fā)生SAP時(shí)PPAR-γ和Angptl4在mRNA及蛋白水平表達(dá)的變化在肺組織損傷中均起到重要的保護(hù)作用。地塞米松具有抑制炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子表達(dá)和分泌的作用;清胰