達肝素鈉對人肺腺癌A549細胞中VEGFR及HIF-1ɑ作用的研究.pdf

1、目的：通過不同濃度達肝素鈉對人肺腺癌 A549細胞株中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的作用的研究，探討達肝素鈉抑制腫瘤細胞增殖的具體機制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞，用不同濃度的達肝素鈉作用于肺腺癌A549細胞24小時，48小時。
　　2. SYBR Green I實時熒光PCR檢測A549細胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表達，及不同濃度達肝素鈉處理A549細胞24h和4

2、8h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表達變化。
　　3.用免疫細胞化學法檢測A549細胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ蛋白表達，及不同濃度達肝素鈉處理A549細胞24h和48h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的蛋白的表達變化。
　　結(jié)果：
　　1. VEGF、VEGFR及 HIF-1ɑ均在肺癌 A549細胞中表達，不同濃度（5IU/ml,15IU/ml,50IU/ml,150IU/ml）的

3、達肝素鈉作用于A549細胞24小時和48小時后，除了5IU/ml作用24h組，VEGF、VEGFR mRNA和蛋白表達量較對照組的表達無統(tǒng)計學意義（P>0.05）外，其余各組 VEGF、VEGFR及 HIF-1ɑ蛋白表達量較對照組均顯著降低VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的表達水平隨藥物濃度加大和時間的延長而逐漸減弱，有明顯的濃度和時間依賴性，差異具有顯著性。（P<0.05）
　　2.肺癌A549細胞中VEGFR、HIF-1ɑ的