達(dá)肝素鈉對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞中VEGFR及HIF-1ɑ作用的研究.pdf

1、目的：通過(guò)不同濃度達(dá)肝素鈉對(duì)人肺腺癌 A549細(xì)胞株中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的作用的研究，探討達(dá)肝素鈉抑制腫瘤細(xì)胞增殖的具體機(jī)制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細(xì)胞，用不同濃度的達(dá)肝素鈉作用于肺腺癌A549細(xì)胞24小時(shí)，48小時(shí)。
　　2. SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)A549細(xì)胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表達(dá)，及不同濃度達(dá)肝素鈉處理A549細(xì)胞24h和4

2、8h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表達(dá)變化。
　　3.用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)A549細(xì)胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ蛋白表達(dá)，及不同濃度達(dá)肝素鈉處理A549細(xì)胞24h和48h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1. VEGF、VEGFR及 HIF-1ɑ均在肺癌 A549細(xì)胞中表達(dá)，不同濃度（5IU/ml,15IU/ml,50IU/ml,150IU/ml）的

3、達(dá)肝素鈉作用于A549細(xì)胞24小時(shí)和48小時(shí)后，除了5IU/ml作用24h組，VEGF、VEGFR mRNA和蛋白表達(dá)量較對(duì)照組的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）外，其余各組 VEGF、VEGFR及 HIF-1ɑ蛋白表達(dá)量較對(duì)照組均顯著降低VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的表達(dá)水平隨藥物濃度加大和時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減弱，有明顯的濃度和時(shí)間依賴性，差異具有顯著性。（P<0.05）
　　2.肺癌A549細(xì)胞中VEGFR、HIF-1ɑ的