茶多酚對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的:
　　1.探討茶多酚對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株增殖、侵襲、粘附的影響。
　　2.研究茶多酚對(duì)A549細(xì)胞survivin基因及P53基因表達(dá)的作用。
　　3.研究茶多酚對(duì)A549細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)產(chǎn)生的影響。
　　方法:
　　1.體外液體培養(yǎng)人肺腺癌A549細(xì)胞。
　　2.應(yīng)用MTT法測(cè)定不同濃度茶多酚對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響。
　　3.使用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)茶多酚

2、對(duì)A549細(xì)胞浸潤(rùn)的影響。
　　4.采用粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)茶多酚對(duì)A549細(xì)胞粘附的影響。
　　5.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)研究茶多酚對(duì)A549細(xì)胞survivin及P53的mRNA表達(dá)的變化。
　　6.ELISA法測(cè)定培養(yǎng)上清液中的VEGF含量變化，探討茶多酚對(duì)A549細(xì)胞產(chǎn)生VEGF的作用。
　　結(jié)果:
　　1.茶多酚對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響:與正常對(duì)照組比較，50、100、150、200、250、300μg/ml茶

3、多酚組顯著抑制A549細(xì)胞增殖，且呈濃度依賴性，其OD值均顯著降低(P＜0.01);IC50為203.75μg/ml;除250μg/ml組和300μ g/ml之間以外，各濃度組之間P＜0.05。
　　2.與對(duì)照組相比，50、100、150、200μ g/ml的茶多酚顯著降低A549細(xì)胞的侵襲力(P＜0.05)。四個(gè)濃度組之間的侵襲細(xì)胞數(shù)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，并且侵襲細(xì)胞數(shù)隨著茶多酚濃度的提高呈逐漸減少。
　　3

4、.與對(duì)照組相比，50、100、150、200μg/ml茶多酚顯著降低A549細(xì)胞的粘附于體外仿真基底膜的能力(P＜0.01)，且粘附細(xì)胞數(shù)隨著茶多酚濃度的提高而減少。
　　4.與正常對(duì)照組比較，50、100、150、200μg/ml茶多酚顯著減少A549細(xì)胞的survivin基因表達(dá)(P＜0.05)，P53基因表達(dá)顯著增強(qiáng)(P＜0.05)。
　　5.與對(duì)照組相比，50、100、150、200μ g/ml茶多酚顯著減少A549

5、細(xì)胞分泌VEGF(P＜0.01)，且隨著茶多酚濃度的提高A549細(xì)胞分泌VEGF逐漸減少(P＜0.05)。
　　6.A549細(xì)胞增殖抑制率與survivin基因的表達(dá)呈高度負(fù)相關(guān)(P＜0.01)，與P53基因的表達(dá)呈明顯正相關(guān)(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　茶多酚在一定范圍內(nèi)抑制A549細(xì)胞的增殖，并與下調(diào)A549細(xì)胞survivin基因表達(dá)及上調(diào)P53基因成正相關(guān);茶多酚在一定范圍內(nèi)抑制A549細(xì)胞的粘附和侵襲力