骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)博萊霉素致小鼠肺纖維化的影響及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）對(duì)博來(lái)霉素致小鼠肺纖維化動(dòng)物模型的影響，探討治療肺纖維化的新方法。 方法：體外分離、培養(yǎng)雄性6-8周C57BL/6J小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞。60只6-8周雌性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為3組：陰性對(duì)照組（P組），陽(yáng)性對(duì)照組（B組），BMSCs治療組（B+M組）。P組于氣管內(nèi)注入PBS50μL，B組及B+M組按5μg/g劑量氣管內(nèi)注入博萊霉素50μL制備肺纖維化模型，B+M組于造模后6h經(jīng)尾靜

2、脈注射BMSCs 1×107/mL，200μL。實(shí)驗(yàn)第3，7，14，28天分別處死5只小鼠，收集小鼠肺泡灌洗液檢測(cè)其細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的濃度；留取肺組織行病理HE染色，羥脯氨酸含量測(cè)定，提取肺組織RNA以檢測(cè)TGF-β1mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4mRNA基因表達(dá)情況；提取肺組織的DNA檢測(cè)雄鼠的性別決定基因（sry基因）。 結(jié)果：1、肺臟組織病理：B+M組在第7、14天的肺泡炎較B組明顯減輕，第2

3、8天肺纖維化程度較B組明顯減輕。2、肺系數(shù)：B及B+M組各時(shí)間點(diǎn)肺系數(shù)均較P組稍高，但B+M組較B組明顯降低。3、HYP含量：在3、7天，三組的HYP含量無(wú)明顯差異；B+M組的HYP含量在第14天與P組相當(dāng)，在28天稍高于P組，但均明顯低于B組。4、TGF-β1mRNA：B及B+M組各時(shí)間點(diǎn)TGF-β1mRNA表達(dá)均較P組高，但在后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組明顯低于B組。5、sry基因檢測(cè)：B+M組各時(shí)間點(diǎn)均有雄性小鼠的sry基因存在。6、肺組

4、織IFN-γ mRNA、IL-4mRNA表達(dá)情況；B及B+M組IFN-γ mRNA、IL-4mRNA表達(dá)在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯高于P組，在后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組IFN-γ mRNA較B組明顯偏低，在后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組IL-4mRNA較B組明顯偏低；比較IL-4mRNA/IFN-γ mRNA，B+M組在后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯低于B組。7、肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4的濃度：B及B+M組IFN-γ、IL-4濃度在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于P組，但在后三個(gè)時(shí)

5、間點(diǎn)B+M組IFN-γ濃度較B組明顯偏低；且其IL-4濃度在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均較B組明顯偏低；比較IL-4/IFN-γ濃度，B+M組在3，14，28天高于P組，在7、14、28天明顯低B組（7、14天：P<0.05；28天P=0.05）。 結(jié)論：1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射可以到達(dá)肺損傷部位，且可以長(zhǎng)期存在；2、外源性BMSCs可以減輕肺泡炎、肺纖維化的程度；3、外源性BMSCs發(fā)揮抗炎、抗纖維化的可能是通過(guò)逆轉(zhuǎn)Th1/Th2細(xì)胞