間充質(zhì)干細(xì)胞對小鼠早期矽肺纖維化的抑制作用.pdf

1、目的:本研究以小鼠矽肺動物模型為研究對象，通過測定相關(guān)生物活性因子初步探討B(tài)MSCs對SiO2粉塵致小鼠肺纖維化的防治作用。
　　 方法:根據(jù)隨機化原則將小鼠分為3個組，即對照組、模型組、移植組，每組30只。對照組小鼠氣管內(nèi)注入生理鹽水，模型組小鼠氣管內(nèi)注入SiO2混懸液20ul(5mg/20ul)，移植組小鼠氣管內(nèi)注入矽塵混懸液SiO2混懸液20ul(5mg/20ul)后于6小時尾靜脈移植BMSCs，細(xì)胞數(shù)量為1×106個。氣

2、管暴露法建立小鼠矽肺模型，模型建立后，于第2、7和14天（造模當(dāng)天為第0天）3個時間點分別取10只小鼠將其處死，取材。HE染色觀察小鼠肺組織形態(tài)學(xué)的變化;堿裂解法檢測小鼠肺組織羥脯氨酸含量;RT-PCR法檢測對照組、模型組和移植組各時間點肺組織中TGF-β1、IL-1β、MMP-2、TNF-α4種生物活性因子mRNA基因表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)方法檢測小鼠肺組織中TGF-β1、IFN-γ蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:1、HE染色法證

3、實氣管注入SiO2粉塵懸液成功建立矽肺模型。2、與對照組比較，模型組小鼠各時間點肺臟器系數(shù)高于對照組（P＜0.05）;與模型組比較，移植組小鼠各時間點肺臟器系數(shù)低于模型組，第7、14天差異具有顯著性(P＜0.05)，但高于對照組，第二天時差異有顯著性(P＜0.05）。隨時間推移各組小鼠肺臟器系數(shù)呈下降趨勢。3、與對照組比較，模型組小鼠各時間點肺組織羥脯氨酸含量高于對照組，但僅在第14天（P＜0.05）時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;與模型組比較，

4、移植組小鼠肺臟器系數(shù)低于模型組，第14天差異具有顯著性(P＜0.05)。4、與對照組比較，模型組在第2、7、14天時肺組織TGF-β1 mRNA表達(dá)高于對照組差異具有顯著性(P＜0.05);與模型組比較，移植組各時間點肺組織中TGF-β1mRNA表達(dá)低于模型組，在各時間點差異有顯著性(P＜0.05），稍高于對照組，沒有統(tǒng)計學(xué)意義。5、與對照組比較，模型組在第2、7、14天時肺組織IL-1βmRNA表達(dá)高于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0

5、5）;與模型組比較，移植組各時間點肺組織中IL-1β mRNA表達(dá)低于模型組，在第2、14天差異有顯著性(P＜0.05)，但高于對照組，第14天差異有統(tǒng)計學(xué)意義。6、與對照組比較，模型組小鼠各時間點肺組織MMP-2mRNA表達(dá)均高于對照組，但僅在第14天時差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，移植組小鼠肺組織MMP-2 mRNA表達(dá)低于模型組，第14天差異具有顯著性(P＜0.05)，移植組高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（(P＜

6、0.01)。7、與對照組比較，模型組小鼠各時間點肺組織TNF-α mRNA表達(dá)均高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，移植組小鼠肺組織TNF-α mRNA表達(dá)低于模型組，第14天差異具有顯著性(P＜0.05)。8、與對照組比較，模型組在第2、7、14天時肺組織TGF-β1蛋白表達(dá)高于對照組差異具有顯著性(P＜0.01）;與模型組比較，移植組各時間點肺組織中TGF-β1mRNA表達(dá)低于模型組，差異有顯著性(P＜0.

7、01），高于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。9、與對照組比較，模型組在第2、7、14天時肺組織IFN-γ蛋白表達(dá)高于對照組，差異具有顯著性職(P＜0.01);與模型組比較，移植組各時間點肺組織中IFN-γ蛋白表達(dá)低于模型組，在各時間點差異有顯著性(P＜0.01)，高于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:1、小鼠支氣管內(nèi)注入二氧化硅顆?？梢鹦∈蠓谓M織炎性和纖維化性病理變化，并有矽性纖維結(jié)節(jié)形成。2、尾靜脈移