沙苑子總黃酮對(duì)博萊霉素致大鼠肺纖維化的干預(yù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察沙苑子總黃酮（Total Flavonoids From Astragalus Complanatus， FAC）對(duì)博萊霉素（Bleomycin，BLM）所致實(shí)驗(yàn)性大鼠肺纖維化的干預(yù)作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：健康SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)三天后隨機(jī)分為正常組、模型組、醋酸潑尼松組及FAC高（140㎎·㎏-1，F(xiàn)AC-H）、中（70㎎·㎏-1，F(xiàn)AC-M）、低（35㎎·㎏-1， FAC-L）劑量組，氣管內(nèi)滴注博萊霉素

2、制作大鼠肺纖維化模型，給予FAC灌胃（ig）治療28d后，觀察大鼠行為狀態(tài)、體重、肺重、肺系數(shù)、血清中總抗氧化（T-AOC）、血清中羥脯氨酸（HYP）的含量；肺組織中T-AOC、 HYP的含量；以ELISA的方法檢測(cè)大鼠肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6的含量；取固定部位肺組織制作病理切片分別行HE、Masson染色，進(jìn)行肺組織病理組織學(xué)檢查；電鏡觀察大鼠肺組織的超微結(jié)構(gòu)改變；以Western blot的方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織中TGF-β

3、1、Smad2、α-SMA的蛋白水平；以Reverse Transcription PCR法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織中TGF-β1、Smad2、Smad7、α-SMA的mRNA表達(dá)水平；以Real Time PCR的方法檢測(cè)大鼠肺組織中miRNA-21、let-7d基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：與正常組相比，模型組大鼠體重顯著減輕（P<0.01），肺重、肺系數(shù)顯著增加（P<0.01），肺泡炎及肺纖維化程度顯著加重（P<0.01）。與模型組相比

4、， FAC各組大鼠血清及肺組織中HYP含量顯著降低（P<0.01），且呈劑量依賴趨勢(shì)；大鼠血清及肺組織中T-AOC增強(qiáng)（P<0.01）；肺泡灌洗液中細(xì)胞因子IL-1β及IL-6的含量顯著降低（P<0.01，P<0.05）；肺組織病理學(xué)觀察可見肺泡炎（P<0.01，P<0.05）及肺組織纖維化（P<0.01）的程度顯著減輕；超微結(jié)構(gòu)觀察顯示肺組織中膠原沉積顯著減少；western blot檢測(cè)結(jié)果顯示TGF-β1/smad信號(hào)通路相關(guān)蛋白

5、TGF-β1、Smad2、α-SMA含量均顯著降低（P<0.01）；Transcription PCR結(jié)果顯示TGF-β1/Smad信號(hào)通路相關(guān)蛋白TGF-β1、Smad2、α-SMA的mRNA的表達(dá)含量均顯著降低（P<0.01），而TGF-β1下游的負(fù)調(diào)節(jié)因子Smad7的mRNA的表達(dá)顯著增加（P<0.01）；Real Time PCR結(jié)果顯示miRNA-21基因表達(dá)下調(diào)，let-7d基因表達(dá)上調(diào)，且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論