東北地區(qū)黃瓜枯萎病拮抗放線菌的篩選及鑒定.pdf

1、放線菌因其產(chǎn)生多種次生代謝物質(zhì)和廣譜性的生物活性物質(zhì)如降解真菌細(xì)胞壁的多種酶和抗生素而受到人們的廣泛關(guān)注。 本文比較了不同溫度、不同孢子激活劑、不同抑制劑、不同培養(yǎng)基等條件對(duì)分離土壤中放線菌的影響，以黃瓜枯萎病菌尖鐮孢菌黃瓜專化型(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum)作為指示菌進(jìn)行拮抗放線菌的篩選。試驗(yàn)結(jié)果表明：將土壤樣品經(jīng)100℃干熱處理1h，并用0.05％的SDS稀釋后，分別涂布于含有1μg/

2、ml青霉素的高氏一號(hào)瓊脂、淀粉瓊脂、腐植酸—維生素瓊脂(HVG)組合培養(yǎng)基上，能有效分離到黃瓜枯萎病菌的拮抗放線菌。 從遼寧、吉林、黑龍江三省的保護(hù)地、河流、鹽堿地、原始森林等生態(tài)條件下采集到土壤樣品218份，利用優(yōu)化后的分離方法共得到放線菌菌株486株。 通過(guò)對(duì)486株放線菌進(jìn)行活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)對(duì)尖鐮孢菌黃瓜專化型(F.oxysporumf.sp.cucumerinum)有抑制作用的菌株93株，對(duì)其中9株高效菌株進(jìn)行形態(tài)

3、特征、細(xì)胞組分、生理生化特性研究，并對(duì)其中4株進(jìn)行16SrDNA序列的同源性分析。結(jié)果表明：甘1菌株的16SrDNA序列與Streptomycesfradiae(弗氏鏈霉菌)相似性為99％，但其明膠不液化，基絲顏色表現(xiàn)為紅色而氣絲粉白色，這與已知S.fradiae菌株不同；T8-41的16SrDNA序列與S.viridochromogenes(綠產(chǎn)色鏈霉菌)相似性為99％，該菌株在ISP鑒定培養(yǎng)基上氣絲表現(xiàn)為灰白色至淺褐色，這與S.vi

4、ridochromogenes存在較大區(qū)別；高②-12的16SrDNA序列與Streptomycesanulatus(環(huán)狀鏈霉菌)相似性為99％，其孢子絲基本無(wú)螺旋，而報(bào)道菌株有5～7螺旋，這是二者不同之處；HVG60的16SrDNA序列與Streptomycesargillaceus(泥質(zhì)鏈霉菌)相似性為98％，該種國(guó)內(nèi)未見(jiàn)報(bào)道。鑒定的4株拮抗放線菌中S.fradiae產(chǎn)生泰樂(lè)菌素(Tylosin)、脫碳糖泰樂(lè)菌素(Desmycosi