土傳病害拮抗放線菌的篩選及功能研究.pdf

1、放線菌為一種常見的土壤微生物，因其可產(chǎn)生抗生素等活性物質(zhì)而備受關(guān)注，其具有巨大的經(jīng)濟(jì)及開發(fā)價(jià)值。本論文對(duì)采自于蘭州興隆山的土壤進(jìn)行了放線菌的分離、拮抗放線菌的篩選、菌種鑒定、誘變選育、發(fā)酵條件研究和活性化合物的初步分離鑒定等方面的研究，研究結(jié)果包括以下內(nèi)容:
　　(1)放線菌的分離。本研究在前人研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行探索，獲得一種更加適宜的方法:采樣后將土樣于室溫下自然風(fēng)干，用0.05％十二烷基硫酸鈉對(duì)其懸浮液進(jìn)行處理，隨后40℃恒溫振

2、蕩20min，再用稀釋平板法接種到含有200mg/L重鉻酸鉀的高氏一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)7天后對(duì)放線菌進(jìn)行分離。共分離獲得10株放線菌菌株。
　　(2)拮抗放線菌的篩選。以尖孢鐮刀菌等植物病原菌為供試菌株對(duì)分離獲得的10株放線菌采用平板對(duì)峙法篩選出8株具有抗菌活性的菌株，并對(duì)8株菌株的發(fā)酵液采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行復(fù)篩獲得抑菌效果最強(qiáng)的菌株K2。
　　(3)菌種鑒定。根據(jù)放線菌K2菌株的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特征和1

3、6SrDNA序列比對(duì)的研究結(jié)果表明，菌株K2為鏈霉菌屬。將其16SrDNA序列于GenBank中注冊(cè)，登錄號(hào)為JX501990。
　　(4)菌株K2發(fā)酵條件研究。以對(duì)尖孢鐮刀菌等植物病原菌抗性為指示，研究了菌株K2產(chǎn)活性物質(zhì)的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液;最佳發(fā)酵時(shí)間為4天;最佳裝液量為50mL;最佳接菌量為5％。
　　(5)誘變選育。研究了紫外線和亞硝基胍對(duì)K2菌株的誘變效應(yīng)，結(jié)果表明，

4、在這兩種誘變劑中，亞硝基胍的誘變效應(yīng)強(qiáng)于紫外線。初步確定了K2菌株的最佳誘變劑為亞硝基胍，最佳處理劑量為1mg/mL，處理時(shí)間為45min。
　　(6)菌株K2發(fā)酵液穩(wěn)定性研究。研究分析了溫度、紫外線及酸堿對(duì)K2菌株發(fā)酵液的影響，結(jié)果表明:放線菌K2菌株發(fā)酵液對(duì)溫度相對(duì)穩(wěn)定，而對(duì)酸堿及紫外線輻射較為敏感。
　　(7)菌株K2發(fā)酵液抑菌譜的測(cè)定。以尖孢鐮刀菌等植物病原菌和大腸桿菌等細(xì)菌為供試菌株，研究表明，菌株K2發(fā)酵液對(duì)植物