兩株拮抗細(xì)菌防治黃瓜枯萎病的研究.pdf

1、1．兩株拮抗細(xì)菌最大抗菌活性培養(yǎng)條件的優(yōu)化 利用管碟法對本實驗室篩選出的兩株具有廣譜生防潛力的拮抗菌M22BH3（Bacillus subtilis M22BH3）、17（Bacillus amyloliquefaciens I7）無細(xì)菌濾液進(jìn)行最大抗菌活性培養(yǎng)條件的優(yōu)化，確定了生防菌M22BH3在LB培養(yǎng)基、30℃、pH8的條件下培養(yǎng)其濾液抗菌活性最強(qiáng)；17菌株在NA培養(yǎng)基、45℃、pH7培養(yǎng)條件下濾液具最大抗菌活性。在培養(yǎng)基

2、中加入促芽孢生長的尿素、土壤浸汁、馬鈴薯淀粉及金屬離子，M22BH3、I7菌株濾液抗菌活性未見提高，這與報道的芽孢桿菌產(chǎn)抗菌代謝物情況存在明顯差異，抗菌物質(zhì)的產(chǎn)生與芽孢形成之間沒有相關(guān)性。 2．兩株拮抗細(xì)菌室內(nèi)及大田條件下對黃瓜枯萎病的影響 研究發(fā)現(xiàn)菌株M22BH3無菌濾液對黃瓜種子的萌發(fā)有抑制作用，處理的種子萌發(fā)率為48．33％，低于陽性對照近20％；17菌株濾液處理的黃瓜種子，萌發(fā)率為75％，明顯高于陽性對照，對種子

3、的萌發(fā)有促進(jìn)作用。室內(nèi)培養(yǎng)通過對種子浸種、秧苗灌根及兩種方法同時采用發(fā)現(xiàn)：I7菌株無菌濾液兩種方法同時采用對黃瓜枯萎病的防治效果較好，防治效果達(dá)69．05％，明顯高于對照，M22BH3菌株無菌濾液防治效果不明顯；同時對兩菌株無菌濾液作用秧苗14d和28d跟蹤，發(fā)現(xiàn)I7菌株無菌濾液處理發(fā)病率上升的幅度較小，防治效果較穩(wěn)定性。大田試驗結(jié)果與室內(nèi)結(jié)果相一致，I7菌株無菌濾液對黃瓜枯萎病的防治效果較好，防治效果高達(dá)70．7％，高于陽性對照近10

4、％，并且經(jīng)過I7菌濾液處理的黃瓜種子，其地上部分的植株生長旺盛、健壯，葉片呈深綠色；M22BH3菌濾液各處理對黃瓜枯萎病的防治效果較對照農(nóng)藥未見顯著差異。 3．兩株拮抗細(xì)菌安全性測定 研究發(fā)現(xiàn)，M22BH3、I7菌劑處理對昆明小鼠急性經(jīng)口LD50均大于5000mg/kg，屬低毒類；急性經(jīng)皮LD50大于2000 mg/kg，亦均屬低毒類：對豚鼠皮膚刺激平均指數(shù)72h后為0，皮膚刺激強(qiáng)度為無刺激性；對兔眼刺激平均指數(shù)48h后