紫杉醇誘導(dǎo)MKN-45胃癌細(xì)胞凋亡及對(duì)cyclinE-cyclinD-,1-表達(dá)的影響.pdf

1、該研究共分三部分.在第一部分中,我們采用MTT法檢測(cè)不同濃度的紫杉醇(0.001、0.01、0.1、1.0 μ mol/L)體外作用MKN-45胃癌細(xì)胞不同時(shí)間(24、48、72、96小時(shí))的生長(zhǎng)抑制率;再以0.1μmol/L紫杉醇作用12h、24h,用Annexin-V-FITC標(biāo)記,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率.并用光鏡觀察0.1μmol/L紫杉醇作用48 h細(xì)胞形態(tài).結(jié)果發(fā)現(xiàn):光鏡下,加入0.1μmol/L泰素24 h后,少數(shù)細(xì)胞體積

2、變小變形,胞膜仍完整,染色質(zhì)濃縮并聚集于核膜下;48 h部分細(xì)胞失去附壁能力,脫落至培養(yǎng)液中.以上形態(tài)改變表明,MKN-45在紫杉醇誘導(dǎo)下出現(xiàn)了細(xì)胞凋亡.另有部分腫脹細(xì)胞,胞膜已破碎,細(xì)胞器崩潰,染色質(zhì)疏松為壞死細(xì)胞.不同濃度的紫杉醇作用24,48,72,96小時(shí)后,對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制作用結(jié)果表明:(1)隨著紫杉醇劑量的增加,細(xì)胞的抑制率升高,具有明顯的劑量依賴性.(2)同一劑量藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率具有時(shí)間依賴性.流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示:0.

3、1 μmol/L紫杉醇作用12h凋亡率為13.44％、作用24h凋亡率為15.89％,兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但與對(duì)照組0.67％有顯著意義(P<0.05);0.01μ mol/L紫杉醇作用24h凋亡率為15.84％與0.1μmol/L組作用24h間無(wú)顯著差異.因此,我們得出結(jié)論:紫杉醇對(duì)MKN-45胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯的抑制作用;泰素可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡,但在一定范圍內(nèi)與藥物劑量及作用時(shí)間無(wú)明顯相關(guān)性.第二部分,我們用0.1μmol/L泰素作

4、用MKN-45胃癌細(xì)胞12h、24h,應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):紫杉醇使細(xì)胞滯留于G<,2>/M期,隨著對(duì)細(xì)胞作用時(shí)間的延長(zhǎng),G<,2>/M期細(xì)胞占細(xì)胞總體比率逐漸上升.作用MKN-45胃癌細(xì)胞12小時(shí)G<,2>/M期細(xì)胞比例為30.15％;作用24小時(shí)G<,2>/M期細(xì)胞比例為49.14％,24小時(shí)組與對(duì)照組(25.96％)有顯著差異(P<0.05).第三部分,用0.1μmol/L紫杉醇作用MKN-45胃癌細(xì)胞24h,