2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩71頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、背景和目的:胃癌是EGFR過表達(dá)的腫瘤,但目前研究顯示胃癌對EGFR-TKI不敏感,可能存在酪氨酸激酶抑制劑的原發(fā)耐藥。在非小細(xì)胞肺癌中非靶受體c-Met繼發(fā)性過表達(dá)與吉非替尼的繼發(fā)性耐藥有關(guān)。c-Met過表達(dá)在胃癌中較為常見,目前有研究發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞生長因子拮抗劑NK4可以提高吉非替尼在胃癌細(xì)胞中的敏感性。提示c-Met的異常表達(dá)可能影響了胃癌對EGFR-TKIs的敏感性。本研究以EGFR與c-Met過表達(dá)且無EGFR突變的胃癌細(xì)胞株MK

2、N-45為研究對象,探索能否通過改變胃癌細(xì)胞的c-Met基因表達(dá)狀態(tài)來改變其對吉非替尼的敏感性,本研究結(jié)果可為是否采用吉非替尼與c-Met抑制劑聯(lián)合治療胃癌提供依據(jù)。
   材料與方法:1、人胃癌細(xì)胞MKN-45獲贈于中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院病理實(shí)驗(yàn)室,置于37℃、5%C02、濕度為80%的培養(yǎng)箱中用含有10%胎牛血清的DMEM(高糖)完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。從Genebank基因數(shù)據(jù)庫獲得c-Met基因序列,設(shè)計3條c-Me t-si RN

3、A序列,委托上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司采用化學(xué)合成法合成。2、通過脂質(zhì)體LipofectaminTM2000介導(dǎo),將3條c-Met-siRNA序列轉(zhuǎn)入人胃癌細(xì)胞MKN-45中,并設(shè)置陰性對照組、LipofectaminTM2000組和空白對照組。3、轉(zhuǎn)染48h后,利用適時定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)方法檢測轉(zhuǎn)染前后胃癌MKN-45細(xì)胞c-Met基因mRNA的變化;利用Western-Blot方法檢測轉(zhuǎn)染前后胃癌M

4、KN-45細(xì)胞c-Met蛋白的變化;利用AnnexinV和PI雙染流式檢測RNA干擾對細(xì)胞凋亡的影響。利用MTT法檢測胃癌細(xì)胞MKN-45對吉非替尼的IC50。4、采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,各組數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn),多組間比較利用單因素ANONA分析,以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
   結(jié)果:1、轉(zhuǎn)染48h后, RT-PCR和Western-Blot方法檢測轉(zhuǎn)染后胃癌細(xì)胞MKN-45

5、 c-Met基因的mRNA和蛋白表達(dá)較三個對照組均明顯下降(P<0.05)。2、轉(zhuǎn)染后胃癌細(xì)胞MKN-45凋亡率明顯增加(P<0.05)。3、轉(zhuǎn)染后胃癌細(xì)胞MKN-45對吉非替尼的IC50未明顯降低(P>0.05)。
   結(jié)論:1、利用RNA干擾技術(shù)可成功下調(diào)胃癌MKN-45細(xì)胞中的c-Met基因的表達(dá)。2、胃癌細(xì)胞MKN-45轉(zhuǎn)染c-Met-siRNA成功后可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。3、沉默c-Met基因未能改善胃癌細(xì)胞MKN-45對

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論