腫瘤壞死因子-α對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響.pdf

1、目的：觀察人腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(EA.hy926)結(jié)構(gòu)和功能的影響，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926，分組加入1、10、100ng/mlTNF-α培養(yǎng)24h，或加入100ng/mlTNF-α培養(yǎng)3、8、12、24 h，采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)細(xì)胞中血管擴(kuò)張刺激磷蛋白（VASP）的表達(dá)水平；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real

2、-time PCR）檢測(cè)細(xì)胞中VASPmRNA的表達(dá)水平，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，采用透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　結(jié)果：與空白對(duì)照組比較，TNF-α引起血管內(nèi)皮細(xì)胞VASP蛋白和mRN A的表達(dá)水平下降，呈時(shí)間和劑量依賴性；隨著TNF-α作用時(shí)間的延長或作用濃度的增加，細(xì)胞受損程度增加，并且可以觀察到細(xì)胞凋亡比率增加。
　　結(jié)論：TNF-α通過破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性增高，呈時(shí)間與