腫瘤壞死因子α和白介素6對(duì)人髓核細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：研究炎癥因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)對(duì)人髓核細(xì)胞凋亡的影響及可能機(jī)制。方法培養(yǎng)人髓核細(xì)胞，將細(xì)胞隨即分為7組：TNF-α刺激組；TNF-α+P38MAPK阻斷組；TNF-α+JNK/SAPK阻斷組；IL-6刺激組；IL-6+P38MAPK阻斷組；IL-6+/JNK/SAPK及對(duì)照組。然后用Annexin V/PI染色流式細(xì)胞儀和TUNEL法檢測(cè)髓核細(xì)胞凋亡情況，免疫熒光檢測(cè)P-P38MAPK和P-JNK/

2、APK的表達(dá)及定位；Western印跡法檢測(cè)P38MAPK，JNK/SAPK及其磷酸化形式的表達(dá)。結(jié)果在流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡結(jié)果中，TNF-α和IL-6刺激組相對(duì)于對(duì)照組及相應(yīng)阻斷組均有著較高的凋亡細(xì)胞密度(P<0.01)；TUNEL法檢測(cè)凋亡結(jié)果中，TNF-α和IL-6刺激組相對(duì)于對(duì)照組及相應(yīng)阻斷組亦均有著較高的凋亡細(xì)胞密度(P<0.01)；免疫熒光結(jié)果顯示TNF-α和IL-6刺激組P-P38MAPK和P-JNK/SAPK在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞

3、核均有表達(dá)，各阻斷組在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核可見少量表達(dá)，對(duì)照組僅見極少量表達(dá)，TNF-α和IL-6刺激組差異和相應(yīng)阻斷組及對(duì)照組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，Western印跡法結(jié)果顯示P38MAPK，JNK/SAPK在各組髓核細(xì)胞內(nèi)均有表達(dá)，但無活化形式，TNF-α和IL-6刺激組可見P-P38MAPK，P-JNK/SAPK表達(dá)，但相應(yīng)阻斷組無表達(dá)。結(jié)論外源性TNF-α司和IL-6可通過激活P38MAPK和JNK/SAPK途徑導(dǎo)致