間充質(zhì)干細胞在角膜移植排斥反應(yīng)中作用的研究.pdf

1、分類號：R77密級：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位團專業(yè)學(xué)位口◎?qū)W校代碼：l0062學(xué)號：20072444學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)天湃醬科^垮TIANJlNMEDICALUNIVERSl丫Y碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目：間充質(zhì)干細胞在角膜移植排斥反應(yīng)中作用的研究TITLEInvestigationoftheroleofmesenchymalstemcellsinkeratoplastyrejection一級學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)

2、科：眼科學(xué)論文作者：焦春娜指導(dǎo)教師：趙少貞教授導(dǎo)師組成員：張曉敏副主任醫(yī)師天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一O年四月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的角膜移植術(shù)是目前器官和組織移植成功率最高的手術(shù)但術(shù)后的免疫排斥反應(yīng)仍是手術(shù)失敗的最主要的原因。間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells，MSCs)能夠抑制多種免疫細胞(包括T淋巴細胞、B淋巴細胞、NK細胞以及樹突狀細胞)的增殖和功能。本研究采用MSCs和／或環(huán)孢霉素A(cyclos

3、porinA，CsA)治療大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)，檢測MSCs在角膜移植大鼠體內(nèi)能否發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，以及其可能的作用機制，試圖建立MSCs移植治療角膜移植排斥反應(yīng)的技術(shù)平臺。方法1原代培養(yǎng)Lewis或Wistar大鼠MSCs，達90％融合時傳代培養(yǎng)。用流式細胞儀檢測培養(yǎng)細胞的表型，并做體外誘導(dǎo)分化實驗，以備后續(xù)實驗使用。2制作大鼠角膜移植動物模型，隨機分為6組。A組給予等量不含藥物的PBS，B組術(shù)后肌注CsA，C組術(shù)前尾靜脈注射MS

4、Cs，D組術(shù)后尾靜脈注射MSCs，E組術(shù)前注射MSCs術(shù)后肌注CsA，F(xiàn)組術(shù)后注射MSCs術(shù)后肌注CsA。裂隙燈下對角膜植片進行臨床觀察，以混濁、水腫和新生血管3項指標作為臨床評估標準，比較6組角膜植片的平均存活時間。術(shù)后10d，A組與D組病理組織學(xué)檢查角膜的結(jié)構(gòu)變化。3角膜移植模型建立后10天，收集A組與D組大鼠脾臟以及腹股溝淋巴結(jié)，分離單個核細胞，在刀豆蛋白A(concanavalinA，ConA)刺激下孵育72h后，采用BrdU試