穩(wěn)恒磁場結(jié)合抗腫瘤藥物羥基喜樹堿對小鼠肝癌細(xì)胞Hepal-6抑制作用的初步研究.pdf

1、目的：研究磁場與抗腫瘤藥物羥基喜樹堿對腫瘤細(xì)胞 Hepa1-6的協(xié)同殺傷作用，并初步探討其機制。 方法： 1.將Hepa1-6細(xì)胞以不同初始密度，在不同時間接種，培養(yǎng)完成后MTT檢測光密度值，繪制不同細(xì)胞密度的生長曲線，以篩選藥物處理時適宜的細(xì)胞初始接種密度； 2.采用不同終濃度的羥基喜樹堿處理Hepa1-6細(xì)胞24h,MTT檢測，以篩選羥基喜樹堿與穩(wěn)恒磁場協(xié)同處理Hepa1-6細(xì)胞時適宜的羥基喜樹堿濃度；

2、 3.采用MTT法檢測了抗腫瘤藥物(羥基喜樹堿)和穩(wěn)恒磁場聯(lián)合處理對Hepa1-6細(xì)胞(小鼠肝癌細(xì)胞)增殖的影響。 4.通過單細(xì)胞凝膠電泳、原子力顯微鏡及流式細(xì)胞儀等分析檢測技術(shù)進(jìn)行磁場結(jié)合抗腫瘤藥物對Hepa1-6細(xì)胞協(xié)同殺傷效應(yīng)的研究。 結(jié)果： 1.Hepa1-6細(xì)胞以1×10<'5>cells/mL的初始細(xì)胞密度接種，MTT檢測的結(jié)果表明，在接種后的60h內(nèi)處于對數(shù)生長期，因而在磁場和藥物處理實驗中，適于

3、作為初始接種密度。 2.以終濃度0.01，0.5，0.1，0.2，0.4，0.8，1.2 μ/mL羥基喜樹堿處理Hepa1-6細(xì)胞24h，MTT檢測顯示，0.2μg/mL及以上終濃度的羥基喜樹堿對Hepa1-6細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用，差異極顯著(P<0.01)。 3.Hepa1-6細(xì)胞以1×10<'5>cells/mL的細(xì)胞密度接種，經(jīng)磁場處理，MTT 檢測的結(jié)果表明曝磁36h時細(xì)胞增殖受到抑制；以濃度為0.2μg/mL羥基喜

4、樹堿聯(lián)合磁場處理Hepa1-6細(xì)胞24h后，磁場可增強羥基喜樹堿對Hepa1-6細(xì)胞的抑制作用，與單純藥物處理相比差異顯著(P<0.05)。 4.0.2μg/mL羥基喜樹堿聯(lián)合磁場處理Hepa1-6細(xì)胞24h后，細(xì)胞形態(tài)改變，細(xì)胞膜不完整，細(xì)胞表面出現(xiàn)突起、孔洞；但SCGE檢測的結(jié)果表明，細(xì)胞DNA沒有出現(xiàn)損傷，顯示二者聯(lián)合后對腫瘤細(xì)胞的抑制作用不是由DNA損傷引起；檢測細(xì)胞周期分布發(fā)現(xiàn)，羥基喜樹堿結(jié)合磁場處理Hepa1-6細(xì)胞