芥子堿對小鼠肝癌H22的抑制作用及其機制初探.pdf

1、原發(fā)性肝癌是惡性腫瘤之首,調(diào)查顯示我國每年死于肝癌的人數(shù)超過11萬,占世界肝癌死亡人數(shù)的45％。在臨床抗腫瘤藥物研究中,源于植物的生物堿一直都是抗腫瘤藥物的重要來源。近年來,生物堿類抗腫瘤作用及其抗腫瘤機制的研究已成為攻克腫瘤這一世紀難題的重要領(lǐng)域之一。但目前臨床上廣泛運用的生物堿類藥物均存在毒副作用強、耐藥性高、選擇性差的缺點,能否找到一種低毒、高效、選擇性好的抗腫瘤藥物已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點。
　　 本研究通過分離、純化

2、白芥子的主要藥效成分--芥子堿,研究其對小鼠肝癌H22的抑制作用及其機制,為芥子堿的開發(fā)應(yīng)用提供參考。
　　 采用溶劑萃取法分離制備芥子堿,以乙醇與水多次交互重結(jié)晶,得到淺黃色針狀結(jié)晶芥子堿,得率為0.382％,并采用高效液相色譜法和分光光度法測定其純度達95％以上。
　　 通過MTT法和細胞排染法檢測芥子堿對小鼠肝癌H22細胞體外增殖的影響,并通過DNA Ladder試驗檢測是否發(fā)生凋亡。結(jié)果顯示:芥子堿對小鼠肝癌H2

3、2細胞增殖有顯著的體外抑制作用,且給藥組出現(xiàn)不同程度的凋亡特征現(xiàn)象。
　　 昆明小鼠接種H22細胞,分別建立腹水型肝癌H22模型和小鼠肝癌H22實體瘤模型,觀察芥子堿對小鼠肝癌H22的體內(nèi)抑制作用,HE染色法觀察細胞形態(tài)。通過檢測胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)探究芥子堿對小鼠免疫器官的影響,并采用丫啶橙染色觀察細胞凋亡形態(tài),瓊脂糖凝膠電泳及免疫組織化學(xué)法研究芥子堿的誘導(dǎo)細胞凋亡機制。實驗結(jié)果顯示:芥子堿對小鼠肝癌H22實體瘤有顯著的抑制作用