HUCMSCs移植對(duì)大鼠亞急性脊髓損傷GAP-43和SPRR1A蛋白表達(dá)及神經(jīng)功能的影響.pdf

1、目的：
　　觀察人臍帶源性間充質(zhì)干細(xì)胞（Human Umbilical cord-derived Mesenchymal Stem Cells HUMSCs）移植治療大鼠亞急性期脊髓損傷(spinal cord injury SCI)，對(duì)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（GAP-43）、小脯氨酸富含蛋白1A（SPRR1A）基因表達(dá)的影響，及促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)的情況，探討臍帶源性間充質(zhì)干細(xì)胞治療亞急性脊髓損傷的作用機(jī)制。
　　方法：
　　

2、1.運(yùn)用改良Allen氏打擊器制備大鼠T10脊髓損傷模型，假手術(shù)組（行單純?nèi)蛋迩谐?、未損傷脊髓、未移植HUCMSCs）12只；單純SCI組(行全椎板切除并用Allen氏打擊器造成脊髓損傷，未移植HUCMSCs)20只；不同劑量干細(xì)胞移植組：1×106移植組（行全椎板切除并用Allen氏打擊器造成脊髓損傷后移植1×106個(gè)HUCMSCs）20只；3×106移植組（行全椎板切除并用Allen氏打擊器造成脊髓損傷后移植3×106個(gè)HUCMS

3、Cs）20只；5×106移植組（行全椎板切除并用Allen氏打擊器造成脊髓損傷后移植5×106個(gè)HUCMSCs）20只。每組再隨機(jī)分為移植術(shù)后第1、7、14、21天4個(gè)亞組，假手術(shù)組每個(gè)亞組3只大鼠,單純SCI組、1×106移植組、3×106移植組、5×106移植組每個(gè)亞組5只大鼠。手術(shù)后第14天，1×106移植組、3×106移植組、5×106移植組經(jīng)尾靜脈注射HUCMSCs生理鹽水懸液。
　　2.移植術(shù)后第1天、7天、14天、2

4、1天,應(yīng)用BBB評(píng)分法評(píng)價(jià)各組大鼠運(yùn)動(dòng)功能的改善情況。
　　3.移植術(shù)后第1天、7天、14天、21天，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)大鼠損傷脊髓GAP-43、SPRR1A基因的表達(dá)情況；移植術(shù)后7、14、21天，利用免疫熒光染色技術(shù)觀察HUCMSCs在體內(nèi)遷移和存活情況；移植術(shù)后21天，利用光鏡及電子顯微鏡觀察損傷脊髓組織形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：
　　1.干細(xì)胞移植各組與單純SCI組的運(yùn)動(dòng)功能均有不同程度的恢復(fù)，干細(xì)胞移植術(shù)

5、后14天、21天干細(xì)胞移植組大鼠運(yùn)動(dòng)功能較單純SCI組改善表現(xiàn)出明顯差異（p＜0.01）；3×106移植組、5×106移植組較1×106移植組運(yùn)動(dòng)功能改善明顯（P＜0.05）。
　　2.移植術(shù)后第7、14、21天脊髓損傷區(qū)組織中GAP-43、SPRR1A表達(dá)顯示：干細(xì)胞移植組較單純SCI組明顯增高（p＜0.01）；3×106移植組、5×106移植組較1×106移植組GAP-43、SPRR1A表達(dá)陽(yáng)性增高有明顯差異（p＜0.05）。

6、
　　3.移植術(shù)后第7、14、21天，免疫熒光觀察到HUCMSCs在脊髓損傷區(qū)及其周圍明顯聚集并存活。
　　4.移植術(shù)后第21天，干細(xì)胞移植組損傷區(qū)脊髓結(jié)構(gòu)與單純SCI組相比，組織形態(tài)相對(duì)完整，3×106移植組、5×106移植組較1×106移植組組織形態(tài)更完整。
　　結(jié)論：
　　HUCMSCs靜脈移植，有利于大鼠亞急性期脊髓損傷區(qū)脊髓結(jié)構(gòu)的修復(fù)及其運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)，可在宿主體內(nèi)向損傷處脊髓組織遷徙、存活并改變脊髓損