嗅鞘細胞移植聯(lián)合應(yīng)用甲基強的松龍對急性脊髓損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及Nogo-A表達的影響.pdf

1、目的： 研究嗅鞘細胞(Olfactory ensheathing Cells，OECs)移植聯(lián)合應(yīng)用大劑量甲基強的松龍對急性脊髓損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及Nogo-A表達的影響。并對其相關(guān)機制進行探討。 方法： 采用改良Nash法分離、原代純化培養(yǎng)大鼠嗅球嗅鞘細胞；雌性SD大鼠126只，隨機分成空白對照組(normal組，n=6)、假手術(shù)組(sham組，n=24)、損傷對照組(Spinal Cord Injury，S

2、CI組n=24)、嗅鞘細胞移植組(OECs組，n=24)、甲基強的松龍注射組(MP組，n=24)以及聯(lián)合干預(yù)組(OECs+MP組，n=24)共6組；參照改良Allen's打擊法，建立急性挫傷型大鼠脊髓損傷模型，OECs組、OECs+MP組于脊髓損傷后即刻進行嗅鞘細胞原位移植，所注射的嗅鞘細胞在移植前進行DAPI標記；MP組則經(jīng)尾靜脈注射大劑量甲基強的松龍，持續(xù)24小時；OECs+MP組在嗅鞘細胞移植的同期經(jīng)尾靜脈注射與MP組同等劑量的甲

3、基強的松龍，術(shù)后1d、3d、7d、14d，參照BBB法進行各組神經(jīng)功能檢測，之后處死動物取材，熒光顯微鏡下觀察嗅鞘細胞的存活情況，并行免疫組織化學法及半定量RT-PCR法檢測Nogo-A表達的變化。 結(jié)果： OECs組、OECs+MP組不同時間點脊髓損傷區(qū)周邊白質(zhì)均觀察到DAPI染色的陽性細胞；SCI+OECs組和SCI+MP組在7d、14d BBB神經(jīng)功能評分要優(yōu)于損傷對照組(P<0.05)，但低于SCI+OECs+M

4、P組(P<0.05)；SCI+OECs組和SCI+MP組之間的神經(jīng)功能評分在各個時間點差異均無顯著性(P>0.1)；SCI后1d、3d，各組間神經(jīng)功能行為學評分無顯著性差異(P>0.05)；免疫組化和RT-PCR法顯示：SCI后3d、7d、14d，SCI+OECs組和SCI+MP組Nogo-A的表達量與SCI組相比，均呈明顯下調(diào)(P<0.01)；但其下調(diào)Nogo-A效應(yīng)低于SCI+OECs+MP組(P<0.01)。 結(jié)論：